【摘要】：以玳玳花瓣為材料,采用RT-PCR和RACE技術(shù),克隆了玳玳HPL基因cDNA全長(zhǎng),全長(zhǎng)為1 776 bp,其中包含52 bp的5′非編碼區(qū),224 bp的3′非編碼區(qū),1 500 bp的編碼區(qū)(編碼499個(gè)氨基酸,分子量為55.7 ku)。將該HPL基因cDNA編碼區(qū)的核苷酸序列及所推導(dǎo)的氨基酸序列與其他植物的HPL基因cDNA序列進(jìn)行比較,推斷玳玳花瓣HPL屬于13-HPL類(lèi)。通過(guò)PCR擴(kuò)增得到了玳玳HPL基因組全長(zhǎng)。測(cè)序結(jié)果顯示玳玳HPL基因中包含1個(gè)長(zhǎng)2 374 bp的內(nèi)含子。將分離出來(lái)的玳玳HPL基因cDNA的編碼區(qū)序列插入pET-15b載體上構(gòu)建原核表達(dá)載體,在細(xì)菌BL21細(xì)胞中進(jìn)行原核表達(dá)。結(jié)果表明:該編碼區(qū)片段可在原核細(xì)胞中大量表達(dá),其表達(dá)產(chǎn)物分子量大小約為55 ku,與13-HPL蛋白的分子量55.7 ku相符。本研究為下一步利用HPL基因cDNA進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化研究奠定基礎(chǔ),將為花卉香味的遺傳改良提供一條新途徑。
[Abstract]:The cDNA of the HPL gene was cloned by RT-PCR and RACE techniques. The total length of cDNA was 1 776 bp, which contained the coding region of 1 500 bp (encoding 499 amino acids) in the 5'non-coding region of 52 bp and the 3'noncoding region of 224bp. Molecular weight is 55.7 ku). The nucleotide sequence and deduced amino acid sequence of the cDNA coding region of the HPL gene were compared with the cDNA sequence of the HPL gene of other plants, and it was inferred that HPL belongs to 13-HPL class. The whole genome of HPL was amplified by PCR. The sequencing results showed that the HPL gene contained a 2 374 bp intron. The coding region of cDNA of HPL gene was inserted into pET-15b vector to construct prokaryotic expression vector, which was expressed in bacterial BL21 cells. The results showed that the coding region could be expressed in prokaryotic cells, and the molecular weight of the expressed product was about 55 ku, and the molecular weight of 13-HPL protein was 55.7 ku. This study laid a foundation for the further study of genetic transformation using HPL gene cDNA, and will provide a new way for genetic improvement of flower fragrance.
【作者單位】： 福建農(nóng)林大學(xué)園藝產(chǎn)品貯藏保鮮研究所;
【分類(lèi)號(hào)】：S685.99

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張濤;沈文濤;言普;黎小瑛;周鵬;;原核表達(dá)dsRNA抗番木瓜畸形花葉病毒的研究[J];熱帶作物學(xué)報(bào);2014年07期

2 梁東;馬鋒旺;張敏;;蘋(píng)果S6PDH基因克隆與原核表達(dá)[J];西北植物學(xué)報(bào);2008年01期

3 姜翠翠;陳桂信;潘東明;呂恃衡;;木奈果實(shí)中花青素合成酶基因PsANS的克隆及原核表達(dá)分析[J];熱帶作物學(xué)報(bào);2011年11期

4 張軍霞;李鼎立;王然;劉成連;原永兵;馬春暉;;砂梨CONSTANS基因的克隆及原核表達(dá)分析[J];植物遺傳資源學(xué)報(bào);2014年04期

5 樊磊;張曉東;陳麗梅;蘇俊;舒群;李昆志;;云南紅梨PyMT基因的克隆、原核表達(dá)和功能分析[J];生命科學(xué)研究;2011年06期

6 曹穎;胡尚連;張慧瑩;唐曉鳳;劉永勝;;番茄醇酰基轉(zhuǎn)移酶基因SlAAT1克隆、序列分析和原核表達(dá)[J];植物研究;2012年06期

7 代紅艷;于翠梅;張志宏;李賀;馬躍;劉月學(xué);;利用原核表達(dá)的外殼蛋白制備草莓輕型黃邊病毒抗血清[J];果樹(shù)學(xué)報(bào);2013年04期

8 黃藝寧;柯麗娜;程祖鋅;;葡萄花青素還原酶基因ORF的克隆與原核表達(dá)[J];山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào);2011年06期

9 李磊;楊遠(yuǎn)柱;劉泓;杜長(zhǎng)青;林建中;朱詠華;劉選明;;金針菇谷氨酸脫氫酶基因的克隆及原核表達(dá)[J];生命科學(xué)研究;2013年03期

10 ;[J];;年期

相關(guān)會(huì)議論文 前2條

1 王秀敏;韓烈保;;豇豆蛋白酶抑制劑基因(CpTI)的克隆及其原核表達(dá)[A];全國(guó)植物分子育種研討會(huì)摘要集[C];2009年

2 張秋平;謝丙炎;楊宇紅;劉志敏;;辣椒CaJERF1基因的克隆及原核表達(dá)研究[A];中國(guó)植物病理學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前5條

1 諶悅;桃PGIP基因的克隆、原核表達(dá)及酵母載體的構(gòu)建[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

2 陳瑤;原核表達(dá)的dsRNA抗番木瓜環(huán)斑病毒的研究[D];海南大學(xué);2012年

3 田曉;CTV p20和p23基因原核表達(dá)及不同分離株中p25蛋白與病毒含量分析[D];西南大學(xué);2014年

4 張濤;原核表達(dá)的dsRNA誘導(dǎo)番木瓜畸型花葉病毒抗性的研究[D];海南大學(xué);2014年

5 王小華;蘋(píng)果APX、DHAR基因和獼猴桃GalDH基因的原核表達(dá)[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2009年

，

本文編號(hào)：2211503