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利用微滴式數字PCR技術分析轉基因玉米抗除草劑標記基因EPSP拷貝數

發(fā)布時間:2018-07-12 19:02

  本文選題:微滴式數字PCR + 轉基因玉米; 參考:《華北農學報》2017年03期


【摘要】:基于微滴式數字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平臺,以轉基因玉米為例,建立了轉基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷貝數分析方法,對待測樣品進行了快速鑒定,并從T_0轉基因玉米株系中鑒定出多個單拷貝單株。對該方法與實時熒光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析結果的準確性方面進行了比較,從試驗數據可以看出,2種檢測方法的結果比較一致,單拷貝檢測結果高度一致;但是ddPCR試驗操作更加簡便,試驗結果可重復性強,試驗數據更加準確可靠。研究表明,ddPCR方法是一種更加便捷、快速和準確的外源基因拷貝數分析新方法,基于其在準確性和靈敏度方面的顯著優(yōu)勢,將會在轉基因作物的外源基因拷貝數分析中得到廣泛的應用。
[Abstract]:Based on droplet digital PCR (droplet digital PCR) platform and taking transgenic maize as an example, a copy number analysis method of exogenous genes in transgenic crops (genetically modified cropsp GM crops) was established, and the samples were identified quickly. Multiple single copy plants were identified from transgenic maize lines. The accuracy of this method was compared with that of quantitative real-time PCR (quantitative real-time PCR). From the experimental data, we can see that the results of the two methods are consistent, and the results of single copy detection are highly consistent. But the ddPCR test is more simple, the test results are more reproducible, and the test data are more accurate and reliable. Studies have shown that the PCR method is a more convenient, rapid and accurate method for the analysis of copy number of foreign genes, based on its remarkable advantages in accuracy and sensitivity. It will be widely used in foreign gene copy number analysis of transgenic crops.
【作者單位】: 長江大學農學院主要糧食作物產業(yè)化湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;北京市農林科學院北京農業(yè)生物技術研究中心北京市農業(yè)基因資源和生物技術重點實驗室;
【基金】:國家轉基因重大專項重點課題(2014ZX0800303B) 北京市農林科學院科研能力創(chuàng)新項目 北京市科委項目(Z171100001517001)
【分類號】:S513

【參考文獻】

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【共引文獻】

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1 王r,

本文編號:2118179


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