本文選題：微滴式數(shù)字PCR + 轉(zhuǎn)基因玉米　； 參考：《華北農(nóng)學(xué)報》2017年03期

【摘要】：基于微滴式數(shù)字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平臺,以轉(zhuǎn)基因玉米為例,建立了轉(zhuǎn)基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷貝數(shù)分析方法,對待測樣品進行了快速鑒定,并從T_0轉(zhuǎn)基因玉米株系中鑒定出多個單拷貝單株。對該方法與實時熒光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析結(jié)果的準(zhǔn)確性方面進行了比較,從試驗數(shù)據(jù)可以看出,2種檢測方法的結(jié)果比較一致,單拷貝檢測結(jié)果高度一致;但是ddPCR試驗操作更加簡便,試驗結(jié)果可重復(fù)性強,試驗數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確可靠。研究表明,ddPCR方法是一種更加便捷、快速和準(zhǔn)確的外源基因拷貝數(shù)分析新方法,基于其在準(zhǔn)確性和靈敏度方面的顯著優(yōu)勢,將會在轉(zhuǎn)基因作物的外源基因拷貝數(shù)分析中得到廣泛的應(yīng)用。
[Abstract]:Based on droplet digital PCR (droplet digital PCR) platform and taking transgenic maize as an example, a copy number analysis method of exogenous genes in transgenic crops (genetically modified cropsp GM crops) was established, and the samples were identified quickly. Multiple single copy plants were identified from transgenic maize lines. The accuracy of this method was compared with that of quantitative real-time PCR (quantitative real-time PCR). From the experimental data, we can see that the results of the two methods are consistent, and the results of single copy detection are highly consistent. But the ddPCR test is more simple, the test results are more reproducible, and the test data are more accurate and reliable. Studies have shown that the PCR method is a more convenient, rapid and accurate method for the analysis of copy number of foreign genes, based on its remarkable advantages in accuracy and sensitivity. It will be widely used in foreign gene copy number analysis of transgenic crops.
【作者單位】： 長江大學(xué)農(nóng)學(xué)院主要糧食作物產(chǎn)業(yè)化湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;北京市農(nóng)林科學(xué)院北京農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心北京市農(nóng)業(yè)基因資源和生物技術(shù)重點實驗室;
【基金】：國家轉(zhuǎn)基因重大專項重點課題(2014ZX0800303B) 北京市農(nóng)林科學(xué)院科研能力創(chuàng)新項目 北京市科委項目(Z171100001517001)
【分類號】：S513

【參考文獻】

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1 姜羽;胡佳瑩;楊立桃;;利用微滴數(shù)字PCR分析轉(zhuǎn)基因生物外源基因拷貝數(shù)[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報;2014年10期

2 ;The Development and Standardization of Testing Methods for Genetically Modified Organisms and their Derived Products[J];Journal of Integrative Plant Biology;2011年07期

3 李志亮;吳忠義;楊清;張秀海;黃叢林;;花粉管通道法在玉米基因工程改良中的應(yīng)用[J];玉米科學(xué);2010年04期

4 萬艷;李麗玲;陳小佳;;應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測外源基因拷貝數(shù)的新方法[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2009年03期

5 王愛民;;實時熒光定量PCR(TaqMan)法測定外源基因的拷貝數(shù)[J];廣西植物;2009年03期

6 王秀君;郎志宏;陸偉;林敏;單安山;黃大f ;;利用花粉管通道法將耐草甘膦基因mG2-epsps導(dǎo)入玉米自交系的研究初報[J];中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報;2008年04期

7 王艷杰;申家恒;;花粉管通道法轉(zhuǎn)基因技術(shù)的細胞胚胎學(xué)機理探討[J];西北植物學(xué)報;2006年03期

8 王永鋒,欒雨時,高曉蓉;花粉管通道法在植物轉(zhuǎn)基因中的研究與應(yīng)用[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2004年06期

9 陳向明;;用CTAB法提取植物DNA的技術(shù)改進[J];合肥教育學(xué)院學(xué)報;2000年04期

【共引文獻】

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1 王r，

本文編號：2118179