本文選題：中華蜜蜂 + 工蜂　； 參考：《昆蟲學(xué)報(bào)》2017年05期

【摘要】：【目的】鑒定中華蜜蜂Apis cerana cerana氣味受體基因并分析其結(jié)構(gòu)特征,明確其在外界蜜粉源充足和缺乏時(shí)期不同發(fā)育階段各組織中的表達(dá)差異,以期為該基因的功能研究提供理論依據(jù)。【方法】利用RT-PCR技術(shù)從中華蜜蜂采集蜂觸角中擴(kuò)增獲得氣味受體基因的cDNA序列;利用生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)分析其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)特性;采用MEGA6.0鄰接法(neighbor-joining)構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹;利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)分析該基因在不同蜜粉源條件下在中華蜜蜂不同日齡(1,5,10,15,20,25和30日齡)工蜂的不同組織(觸角、頭(去除觸角)、胸(去除翅)、腹、足和翅)中的表達(dá)差異�！窘Y(jié)果】從中華蜜蜂采集蜂觸角中克隆獲得了中華蜜蜂氣味受體基因Acer OR113的cDNA序列(Gen Bank登錄號(hào):KT252877.1)。該基因的開放閱讀框(ORF)長(zhǎng)1 035 bp,編碼344個(gè)氨基酸,成熟蛋白分子量為40.13 kD,理論等電點(diǎn)(pI)7.05,無信號(hào)肽,含有6個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)且N端位于胞內(nèi),在第59-343位氨基酸之間存在一個(gè)昆蟲氣味受體家族7tm-6 superfamily保守結(jié)構(gòu)域。Acer OR113與西方蜜蜂Apis mellifera的Amel OR113親緣關(guān)系最近,氨基酸序列一致性高達(dá)94%。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,無論外界環(huán)境中蜜粉源是否充足,Acer OR113在不同日齡工蜂觸角中的表達(dá)量均極顯著高于其他組織(P0.01),腹部中的表達(dá)量最低;外界蜜粉源充足時(shí)各日齡工蜂觸角中Acer OR113的表達(dá)量均極顯著低于蜜粉源缺乏時(shí)相應(yīng)日齡工蜂觸角中的表達(dá)量(P0.01)。【結(jié)論】Acer OR113具有昆蟲氣味受體的典型特征,其基因特異性高表達(dá)于中華蜜蜂成蟲觸角中,且表達(dá)量在外界蜜粉源缺乏時(shí)期高于在蜜粉源充足時(shí)期,推測(cè)其主要與識(shí)別外界蜜粉源的花香氣味有關(guān)。
[Abstract]:[objective] to identify the odor receptor gene of honeybee Apis cerana and analyze its structural characteristics, and to determine the difference of its expression in different developmental stages of external nectar source. [methods] the cDNA sequence of the odour receptor gene was amplified from the antennae of honeybee bee by RT-PCR, and the structural characteristics of the encoded protein were predicted by bioinformatics software. The phylogenetic tree was constructed by MEGA 6.0 contiguous method (neighbor-joining), and the antennae of different tissues (antennae) of worker bees were analyzed by real-time fluorescence quantitative PCR under different nectar source conditions. [results] the cDNA sequence of the odor receptor gene Acer OR113 was cloned from the antennae of honeybees (GenBank accession number: KT252877.1). The open reading frame (ORF) of the gene is 1 035 BP long, encodes 344 amino acids, the molecular weight of mature protein is 40.13 KD, the theoretical isoelectric point (Pi) is 7.05, it contains 6 transmembrane structures and the N terminal is located in the cell. There is a conserved domain of insect odor receptor family 7tm-6 superfamily between the 59-343 amino acids. The conserved domain of Acer OR113 is closely related to the Amel OR113 of western honeybee Apis mellifera. The results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that the expression of Acer OR113 in the antennae of worker bees at different ages was significantly higher than that in other tissues (P0.01), and the lowest in abdomen, regardless of whether the nectar source was sufficient or not. The expression of Acer OR113 in the antennae of worker bees was significantly lower than that in workers' antennae in the absence of nectar powder (P0.01). [conclusion] Acer OR113 has the typical characteristics of insect odor receptors. Its gene specificity was highly expressed in the antennae of adult honeybee, and the expression level was higher in the period of lack of external honey powder than in the sufficient period of pollen source, which was probably related to the identification of the smell of flowers from the external pollen source.
【作者單位】： 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;山西農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31502021,31272513)
【分類號(hào)】：Q78;S891

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7 張t盼，

本文編號(hào)：2109514