本文選題：紅花 + 二氫吡啶二羧酸合酶��； 參考：《中草藥》2017年02期

【摘要】：目的克隆紅花Carthamus tinctorius賴氨酸合成途徑關(guān)鍵酶二氫吡啶二羧酸合酶(dihydrodipicolinate synthase,DHDPS)基因并研究其在不同發(fā)育時期紅花籽粒中的表達量。方法根據(jù)紅花轉(zhuǎn)錄組文庫注釋信息篩選出與紅花DHDPS(Ct DHDPS)基因相關(guān)的Unigenes,設(shè)計引物,以紅花總RNA的反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板,采用RT-PCR技術(shù)克隆Ct DHDPS基因片段,連接p EASY-T1克隆載體,經(jīng)PCR和酶切鑒定,篩選陽性克隆并測序。同時利用熒光定量PCR技術(shù)對其在紅花籽粒不同發(fā)育時期基因表達量進行分析。結(jié)果分離到長度為396 bp的Ct DHDPS基因片段,系統(tǒng)發(fā)育樹分析表明該基因與其他物種的DHDPS基因具有較高的同源性。結(jié)論克隆了Ct DHDPS基因的核心片段,根據(jù)Ct DHDPS基因片段設(shè)計引物,對不同品種不同發(fā)育時期紅花種子進行基因表達量分析,Ct DHDPS基因在紅花品種川紅1號初花后14 d表達量最高。
[Abstract]:Objective to clone the dihydrodipicolinate synthase (dihydrodipicolinate synthase) gene from Carthamus tinctorius lysine biosynthesis pathway and to study its expression in Carthamus tinctorius grains at different developmental stages. Methods Unigeneses related to DHDPS (Ct DHDPS) gene were screened according to the annotated information of Carthamus transcriptome library. Primers were designed. The fragment of Ct DHDPS gene was cloned by RT-PCR and cloned into pEASY-T1 clone vector using reverse transcription product of total RNA of safflower as template. The positive clones were screened and sequenced by PCR and enzyme digestion. At the same time, fluorescence quantitative PCR technique was used to analyze the gene expression in different development stages of safflower grain. Results A 396bp fragment of Ct DHDPS gene was isolated. Phylogenetic tree analysis showed that this gene had high homology with DHDPS gene of other species. Conclusion the core fragment of Ct DHDPS gene was cloned and primers were designed according to the fragment of Ct DHDPS gene. The expression of Ct DHDPS gene in different varieties and different development stages of safflower seeds was analyzed. The expression level of Ct DHDPS gene was the highest 14 days after the early flowering of Ct DHDPS gene.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生物反應(yīng)器與藥物開發(fā)教育部工程研究中心;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材學(xué)院;吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家高技術(shù)研究發(fā)展(“863”)計劃(2011AA100606) 國家自然科學(xué)基金資助項目(31401445) 吉林省科技廳醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)推進計劃項目(20140311034YY) 教育部博士點基金(20122223120002)
【分類號】：S567.219

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號：2102888