單核細(xì)胞性李斯特菌基因dal的敲除及其生物學(xué)特性初步分析
發(fā)布時(shí)間:2018-07-03 17:42
本文選題:單核細(xì)胞性李斯特菌 + 基因敲除。 參考:《食品科學(xué)》2017年22期
【摘要】:在單核細(xì)胞性李斯特菌(Listeria monocytogenes)野生株EGDe act A及inl B雙基因缺失株(EGDeΔact AΔinl B)的基礎(chǔ)上,利用同源重組的方法進(jìn)一步構(gòu)建了缺失營(yíng)養(yǎng)基因dal的菌株(EGDe Δact AΔinl BΔdal),并對(duì)該缺失菌株生長(zhǎng)狀態(tài)、毒力基因表達(dá)水平、生物被膜的形成量及細(xì)胞侵襲等方面作進(jìn)一步分析。結(jié)果顯示,37℃搖床培養(yǎng)6 h后,缺失株的菌濃度顯著低于EGDe Δact AΔinl B(P0.001),培養(yǎng)基中補(bǔ)充D-丙氨酸的缺失株生長(zhǎng)速率與親本株相比無(wú)顯著差異;實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)果顯示,缺失株的sig B基因表達(dá)水平變化最明顯(P0.01),約下調(diào)90%;缺失株生物被膜形成量顯著增加(P0.05),培養(yǎng)基補(bǔ)充D-丙氨酸后缺失株生物被膜的生成量與親本株相比無(wú)差異;對(duì)Coca-2細(xì)胞的侵襲無(wú)影響,表明該基因?qū)?xì)菌生長(zhǎng)能力及生物被膜形成具有重要的調(diào)控作用,并不影響菌株對(duì)細(xì)胞的侵襲力。此缺失株的構(gòu)建為進(jìn)一步研究基因dal的功能提供了理論支持。
[Abstract]:Based on the wild strains of Listeria monocytogenes (EGDe act A) and inl B double gene deletion strain (EGDe 螖 act A 螖 inl B), the strain of dal (EGDe 螖 act A 螖 inl B 螖 dal),) was further constructed by homologous recombination. Virulence gene expression level, biofilm formation and cell invasion were further analyzed. The results showed that the concentration of the missing strain was significantly lower than that of EGDe 螖 act A 螖 inl B (P0.001) after 6 h culture at 37 鈩,
本文編號(hào):2094487
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