滇牡丹類黃酮3-O-葡萄糖基轉移酶基因的鑒定及表達分析
本文選題:滇牡丹 + GT ; 參考:《基因組學與應用生物學》2017年04期
【摘要】:在植物中,類黃酮3-O-葡萄糖基轉移酶(F3GT)將不穩(wěn)定的花色素轉變?yōu)榉(wěn)定的花色素苷,是花色素苷形成的關鍵酶。本研究采樣RT-PCR技術從滇牡丹中成功克隆獲得一個完整的F3GT基因(Pd F3GT1),其含有1 371 bp的開放閱讀框(ORF),編碼456個氨基酸。該基因推斷的蛋白與葡萄(Vitis vinifera)3GT蛋白的相似性為64%;與已知功能的3GT基因進行系統(tǒng)進化分析,結果顯示Pd3GT1與葡萄3GT聚類到同一個分支。氨基酸比對顯示Pd3GT1蛋白序列還有糖基轉移酶家族特有的PSPG-box結構域。半定量PCR結果顯示:Pd3GT1在花蕾,花開時期的花瓣中大量表達,在葉和花芽中有微弱表達;在根和莖中沒有表達。說明Pd3GT基因表達具有組織表達特異性。該研究將為研究滇牡丹花色素形成機理,以及對滇牡丹類黃酮糖基轉移酶的功能鑒定和利用基因工程手段改良花卉品質提供理論依據(jù)。
[Abstract]:In plants, flavonoid 3-O- glucosyltransferase F3GT) converts unstable anthocyanins into stable anthocyanins, which is the key enzyme for anthocyanin formation. In this study, a complete F3GT gene, Pd-F3GT1, was successfully cloned from Peony by sampling RT-PCR, which contained an open reading frame of 1 371 BP, encoding 456 amino acids. The similarity between the deduced protein and Vitis vinifera 3GT protein was 64, and the phylogenetic analysis showed that Pd3GT1 and grape 3GT were clustered into the same branch. Amino acid alignment showed that the Pd3GT1 protein sequence and the PSPG-box domain of the glycosyltransferase family. The results of semi-quantitative PCR showed that Pd3GT1 was strongly expressed in flower buds and petals at flowering stage, but weakly in leaves and flower buds, but not in roots and stems. The results showed that the expression of PD 3 GT gene had tissue expression specificity. This study will provide a theoretical basis for the study of the formation mechanism of pigment, the function identification of flavonoid glycosyltransferase and the improvement of flower quality by genetic engineering.
【作者單位】: 云南林業(yè)學科院云南省森林植物培育與開發(fā)利用重點實驗室;云南林業(yè)學科院國家林業(yè)局云南珍稀瀕特森林植物繁育和保護重點實驗室;西南林業(yè)大學;
【基金】:云南省林業(yè)科學院重點實驗室自主創(chuàng)新項目(22CX2016-05) 云南省科技計劃項目(2015A005) 云南省應用基礎研究重點項目(2013FA054)共同資助
【分類號】:Q943.2;S685.11
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,本文編號:2040802
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