本文選題：蘋果樹腐爛病 + 鋅指蛋白　； 參考：《河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：本研究采用接種離體枝條的方法,對150個(gè)蘋果樹腐爛病菌的T-DNA插入突變體庫中的突變體進(jìn)行了致病性的篩選,經(jīng)過多次試驗(yàn)得到了3個(gè)致病力明顯減弱的突變體,編號為X4379,X4368,X4468�；蚪M重測序結(jié)果顯示,突變體X4379有2個(gè)T-DNA插入位點(diǎn),分別是鋅指蛋白3(Vmzfp3)和跨膜蛋白42(Vmtme42)。以蘋果樹腐爛病菌的全基因組序列為依托,設(shè)計(jì)引物,構(gòu)建敲除載體以及互補(bǔ)表達(dá)載體。運(yùn)用PEG的方法轉(zhuǎn)化蘋果樹腐爛病菌,分別獲得Vmzfp3和Vmtme42的敲除轉(zhuǎn)化子和互補(bǔ)轉(zhuǎn)化子。對Vmzfp3和Vmtme42基因敲除轉(zhuǎn)化子、互補(bǔ)轉(zhuǎn)化子以及野生型蘋果樹腐爛病菌菌絲形態(tài)和致病力進(jìn)行分析。與野生型菌株03-8相比,Vmzfp3的敲除轉(zhuǎn)化子的菌絲生長速率明顯減慢,致病力也明顯下降,其互補(bǔ)轉(zhuǎn)化子使得這些功能缺陷均得以恢復(fù)。Vmtme42的敲除轉(zhuǎn)化子無明顯區(qū)別。由此證明基因Vmzfp3對病菌的菌絲生長,病菌的致病力具有調(diào)控作用。
[Abstract]:In this study, the pathogenicity of 150 T-DNA mutants inserted into mutants library of apple tree rot bacteria was screened by inoculating in vitro. After many experiments, three mutants with significantly weakened pathogenicity were obtained, named X4379X 4368C X4468. The results of genome re-sequencing showed that the mutant X4379 had two T-DNA insertion sites, namely zinc finger protein 3 (Vmzfp3) and transmembrane protein 42 (Vmtme 42). The knockout vector and complementary expression vector were constructed based on the whole genome sequence of apple tree rot pathogen. By using PEG method, the knockout transformants and complementary transformants of Vmzfp3 and Vmtme42 were obtained. The mycelium morphology and pathogenicity of Vmzfp3 and Vmtme42 knockout transformants, complementary transformants and wild apple tree rot bacteria were analyzed. Compared with wild-type strain 03-8, the mycelium growth rate and pathogenicity of the knockout transformants of Vmzfp3 were significantly decreased, and their complementary transformants could restore the knockout transformants of .Vmtme42. It was proved that Vmzfp3 could regulate the mycelium growth and pathogenicity of the pathogen.
【作者單位】： 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院;西北農(nóng)林科技大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院/旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：基金項(xiàng)目:國家蘋果現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-28)
【分類號】：S436.611.11

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本文編號：2036327