本文選題：基因轉(zhuǎn)染 + 白細(xì)胞介素-　； 參考：《軍事醫(yī)學(xué)》2017年04期

【摘要】：目的建立一種可實(shí)時(shí)、無(wú)創(chuàng)、特異監(jiān)測(cè)肝白細(xì)胞介素-6(IL-6)瞬時(shí)表達(dá)的小鼠模型。方法通過(guò)水動(dòng)力高壓轉(zhuǎn)染法將IL-6啟動(dòng)子啟動(dòng)的螢火蟲(chóng)熒光素酶(Fluc)報(bào)告基因載體定向轉(zhuǎn)染至小鼠肝,采用活體生物發(fā)光成像檢測(cè)炎癥刺激條件下肝Fluc的表達(dá)情況,并考察發(fā)光強(qiáng)度與肝IL-6表達(dá)的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果高壓水動(dòng)力法成功將p IL-6-Fluc報(bào)告基因遞送至小鼠肝,約使20%肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞表達(dá)目的基因。該法可造成一過(guò)性肝損傷但可在5~7 d恢復(fù)正常。p IL-6-Fluc可被脂多糖(LPS)激活,峰值時(shí)可上升(46.80±13.35)倍,遠(yuǎn)高于ELISA檢測(cè)結(jié)果[(4.09±0.96)倍]。結(jié)論通過(guò)尾靜脈水動(dòng)力高壓轉(zhuǎn)染法可將p IL-6-Fluc特異性地遞送至小鼠肝進(jìn)而建立活體成像法檢測(cè)小鼠肝IL-6瞬時(shí)表達(dá)模型;經(jīng)驗(yàn)證,該模型可特異性地反映IL-6激活情況,且其靈敏度高于經(jīng)典的ELISA方法。
[Abstract]:Objective to establish a mouse model of real-time, noninvasive and specific monitoring of the transient expression of interleukin-6 (IL-6) in the liver. Methods the fluorescent luciferase (luciferase) reporter gene vector of IL-6 promoter was transfected into mouse liver by hydrodynamic high pressure transfection. The expression of Fluc was detected by in vivo bioluminescence imaging. The relationship between the intensity of luminescence and the expression of IL-6 in liver was investigated. The method could cause transient liver injury but could be activated by lipopolysaccharide (LPS) on the 7th day, and the peak value could be increased by 46.80 鹵13.35 times, which was much higher than that of Elisa [4.09 鹵0.96]. Conclusion pIL-6-Fluc can be specifically delivered to mouse liver by tail vein hydrodynamic high pressure transfection method, and then establish an in vivo imaging method to detect the transient expression of IL-6 in mouse liver, and it is proved that the model can reflect the activation of IL-6 specifically. The sensitivity of Elisa is higher than that of classical Elisa.
【作者單位】： 泰山醫(yī)學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院野戰(zhàn)輸血研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上資助項(xiàng)目(81371806);國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81401369) 軍隊(duì)“十三五”重點(diǎn)項(xiàng)目(BWS16J006-08)
【分類(lèi)號(hào)】：R-332

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本文編號(hào)：2029402