本文選題：植物凝集素 + Le　； 參考：《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2016年12期

【摘要】：植物凝集素是含有一個或者多個非催化結(jié)構(gòu),并能可逆結(jié)合特異單糖或寡糖的蛋白,它具有凝集細(xì)胞、沉淀多糖和糖蛋白的功能。近年來,植物凝集素因其獨特的生理功能,在農(nóng)作物抗蟲工程中獲得了廣泛的關(guān)注。本研究采用RT-PCR的方法,從浙江苞蘿黃大豆葉片中成功克隆了一個新的豆科凝集素Le4基因,利用p ET-28a質(zhì)粒構(gòu)建了Le4基因的原核表達(dá)載體,成功表達(dá)了Le4蛋白。通過對誘導(dǎo)溫度及異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)終濃度等條件進(jìn)行優(yōu)化,利用Western blotting技術(shù),在Le4表達(dá)菌株超聲破碎后的上清液中檢測到了可溶性的Le4蛋白。通過涂抹法將含有可溶性Le4表達(dá)蛋白的大腸桿菌菌液涂抹在小麥葉片上,與涂抹空載體菌液相比,小麥葉片麥長管蚜數(shù)目減少了約50%。以上結(jié)果初步表明來源于大豆的凝集素基因Le4蛋白具有殺蟲效應(yīng)。
[Abstract]:Plant lectin is a protein with one or more non-catalytic structures that can reversibly bind to specific monosaccharides or oligosaccharides. It has the functions of agglutinating cells, precipitating polysaccharides and glycoproteins. In recent years, plant lectin has gained wide attention in crop insect resistance engineering because of its unique physiological function. In this study, a new legume lectin Le4 gene was successfully cloned from the leaves of Zhejiang Buxiahuang soybean by RT-PCR method. The prokaryotic expression vector of Le4 gene was constructed by using p ET-28a plasmid, and the Le4 protein was successfully expressed. By optimizing the induction temperature and the final concentration of isopropyl- 尾 -Dthioglycoside, soluble Le4 protein was detected in the supernatant of Le4 expression strain after ultrasonic crushing by Western blotting technique. The Escherichia coli solution containing soluble Le4 expression protein was applied to wheat leaves by smearing. Compared with the empty carrier solution, the number of wheat aphid in wheat leaves was reduced by about 50%. These results indicated that the agglutinin gene Le4 protein derived from soybean had insecticidal effect.
【作者單位】： 南昌大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院江西省分子生物學(xué)與基因工程重點實驗室;江西省超級水稻研究發(fā)展中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31401038,31360338) 2015年度南昌大學(xué)研究生創(chuàng)新專項資金(cx2015103)共同資助
【分類號】：Q943.2;S43

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本文編號：1981747