本文選題：掌葉半夏 + 掌葉半夏凝集素��； 參考：《華北農(nóng)學(xué)報(bào)》2017年02期

【摘要】：為了克隆掌葉半夏凝集素基因(Pinellia pedatisecta agglutinin,PPA),并對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析和亞細(xì)胞定位。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增掌葉半夏凝集素基因的ORF序列,構(gòu)建pCAMBIA1300-35S-PPA-e GFP重組載體,導(dǎo)入農(nóng)桿菌GV3101并在煙草中進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá),采用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察其亞細(xì)胞定位。克隆獲得的PPA基因全長由777個(gè)核苷酸組成,編碼258個(gè)氨基酸,含有3個(gè)甘露糖結(jié)合位點(diǎn)和2個(gè)保守的B-lectin結(jié)構(gòu)域,Gen Bank登錄號為KF154981,氨基酸序列登錄號為AGV40779。序列比對表明,該序列與天南星、滴水珠、花南星和半夏凝集素的氨基酸序列相似性分別為96%,91%,86%和83%。亞細(xì)胞定位的結(jié)果表明,pCAMBIA1300-35S-PPA-e GFP融合蛋白在細(xì)胞核內(nèi)無分布,而是點(diǎn)狀分布在細(xì)胞質(zhì)膜上。為進(jìn)一步解析掌葉半夏凝集素基因的結(jié)構(gòu)與功能,開展掌葉半夏凝集素抗病蟲害機(jī)制的研究奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to clone Pinellia pedatisecta agglutininine (PPAA), the lectin gene of Pinellia ternata was analyzed by bioinformatics and subcellular localization. The ORF sequence of the lectin gene of Pinellia ternata was amplified by PCR, and the recombinant vector of pCAMBIA1300-35S-PPA-e GFP was constructed. The recombinant vector was introduced into Agrobacterium tumefaciens GV3101 and expressed instantaneously in tobacco. The subcellular localization was observed by laser scanning confocal microscopy. The cloned PPA gene is composed of 777 nucleotides and encodes 258 amino acids. It contains three mannose binding sites and two conserved B-lectin domain Genin Bank accession number is KF154981, and the amino acid sequence accession number is AGV40779. The sequence alignment showed that the amino acid sequence similarity between the sequence and the Amino acid sequence of Tiananxing, droplets, Pternata and Pinellia ternata were 961.86% and 833%, respectively. The results of subcellular localization showed that pCAMBIA1300-35S-PPA-e GFP fusion protein was not distributed in the nucleus, but in the cytoplasmic membrane. In order to further analyze the structure and function of the lectin gene of Pinellia ternata and to develop the mechanism of resistance to diseases and insect pests of Pinellia ternata lectin.
【作者單位】： 西華師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：四川省教育廳重大培育項(xiàng)目(15CZ0015) 西華師范大學(xué)青年教師資助專項(xiàng)(1D012);西華師范大學(xué)青年教師資助專項(xiàng)(14D012)
【分類號】：S567.239

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本文編號：1976078