本文選題：杭菊 + DFR基因�。� 參考：《中草藥》2016年07期

【摘要】：目的克隆杭菊Chrysanthemum morifolium二氫黃酮醇還原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)基因,并研究其在花芽分化期及開花期不同時期的表達(dá)特征。方法根據(jù)已報道的菊花Chrysanthemum morifolium DFR基因序列設(shè)計引物,通過熒光定量PCR(RT-PCR)技術(shù)從杭菊頭狀花序中擴(kuò)增出目的基因片段,連接、轉(zhuǎn)化、挑取陽性克隆測序并拼接;采用基于內(nèi)參基因的相對定量PCR方法,分析該基因表達(dá)量特征。結(jié)果得到全長1 152 bp的杭菊DFR基因,最大開放閱讀框1 029 bp,共編碼342個氨基酸。NCBI上進(jìn)行Blast比對,該基因與其他植物的DFR基因有很高的同源性。RT-PCR表明該基因在花芽分化時期不同階段以及開花期不同時期花不同部位中表達(dá)量均有差異�；ㄑ糠只瘯r期杭菊DFR基因在50 d表達(dá)量最高;開花期該基因在時期I的管狀花中表達(dá)量最高,在時期II的花序托中表達(dá)量最低。結(jié)論克隆得到杭菊DFR基因c DNA序列,該基因表達(dá)存在時間和空間上的差異,表達(dá)量在花蕾膨大成熟到舌狀花開放30%的時間段內(nèi)最高。該結(jié)果為進(jìn)一步進(jìn)行該基因在杭菊中的表達(dá)與催化產(chǎn)物的關(guān)系和調(diào)控機(jī)制研究奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to clone the dihydroflavone reductase (Chrysanthemum morifolium) gene from Chrysanthemum morifolium and study its expression in different stages of flower bud differentiation and flowering. Methods according to the reported Chrysanthemum morifolium DFR gene sequence of chrysanthemum, primers were designed and amplified from the head of Chrysanthemum chrysanthemum by fluorescence quantitative PCRRT-PCRR technique. The target gene fragment was ligated, transformed, sequenced and sequenced. The relative quantitative PCR method based on internal reference gene was used to analyze the expression characteristics of this gene. Results A total length of 1 152 BP DFR gene was obtained, and the maximum open reading frame was 1 029 BP, encoding 342 amino acids. NCBI was used for Blast comparison. RT-PCR showed that the gene was expressed in different stages of flower bud differentiation and in different parts of flower in flowering stage. The expression of DFR gene was the highest in flowering stage I and the lowest in inflorescence peduncle of stage II. Conclusion the c DNA sequence of DFR gene was obtained by cloning. The expression of c DNA gene was different in time and space, and the expression level was the highest in the period of blooming from blooming bud to 30% blooming of tongue flower. The results laid a foundation for the further study of the relationship between the expression of the gene and the catalytic products and the regulation mechanism in Hangzhou Chrysanthemum.
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥材研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81503180)
【分類號】：S567.239

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本文編號：1935077