本文選題：副干酪乳桿菌 + 細(xì)菌素�。� 參考：《食品科學(xué)》2017年12期

【摘要】：構(gòu)建副干酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei)組氨酸蛋白激酶prcK基因缺失突變株,為prcK基因功能研究提供實(shí)驗(yàn)工具。采用同源重組技術(shù)構(gòu)建質(zhì)粒p KLKRT(含prcK::Tet~r基因),將其電轉(zhuǎn)化進(jìn)入L.paracaseiHD1.7中,使prcK::Tet~r基因同源重組到L.paracasei HD1.7的染色體上,通過四環(huán)素耐藥、氨芐青霉素敏感等特性篩選出含有prcK::Tet~r基因的新L.paracasei HD1.7。結(jié)果表明,經(jīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)驗(yàn)證及酶切驗(yàn)證后確定質(zhì)粒p KLKRT構(gòu)建成功,并成功轉(zhuǎn)化入L.paracasei HD1.7中,經(jīng)PCR確認(rèn)L.paracasei HD1.7 prcK基因缺失突變株構(gòu)建成功。該突變株產(chǎn)生的細(xì)菌素效價(jià)比出發(fā)菌株低23.61%。采用同源重組方法成功構(gòu)建L.paracasei HD1.7 prcK基因缺失突變株,為研究L.paracasei HD1.7群體效應(yīng)相關(guān)基因的分子機(jī)理奠定基礎(chǔ)。
[Abstract]:The mutant of histidine protein kinase (prcK) of Lactobacillus paracia paracae was constructed to provide experimental tools for the study of prcK gene function. The plasmid pKLKRT( containing prcK::Tet~r gene) was constructed by homologous recombination technique, which was electrotransformed into L.paracaseiHD1.7, and the prcK::Tet~r gene was homologous recombined into the chromosome of L.paracasei HD1.7. The new L.paracasei HD1.7 containing prcK::Tet~r gene was screened by tetracycline resistance and ampicillin sensitivity. The results showed that the plasmid p KLKRT was successfully constructed and transformed into L.paracasei HD1.7 by polymerase chain reactionation (PCR) and restriction endonuclease assay (PCR), and the L.paracasei HD1.7 prcK gene deletion mutant was successfully constructed by PCR. The bacteriocin titer of the mutant was 23.61 lower than that of the original strain. The homologous recombination method was used to construct L.paracasei HD1.7 prcK gene deletion mutants, which laid a foundation for studying the molecular mechanism of L.paracasei HD1.7 population effect-related genes.
【作者單位】： 黑龍江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;黑龍江大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物技術(shù)教育部工程研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31470537;31570492) 黑龍江省高等學(xué)�？萍紕�(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(農(nóng)業(yè)微生物發(fā)酵技術(shù))項(xiàng)目(2012td009)
【分類號】：TS201.3

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本文編號：1885573