本文選題：大豆肌醇加氧酶 + 大豆胞囊線蟲��； 參考：《中國油料作物學報》2017年06期

【摘要】：肌醇加氧酶通常與植物細胞壁的合成以及誘導合胞體發(fā)育相關。為確定大豆胞囊線蟲侵染大豆根部后,肌醇加氧酶基因表達水平的變化,以感病品種遼豆15和抗病品種灰皮支黑豆、哈爾濱小黑豆和小粒黑豆為試驗材料,在人工接種大豆胞囊線蟲3號生理小種后,利用實時熒光定量PCR檢測肌醇加氧酶家族基因表達量。結果表明,抗病品種中GmMIOX2基因均在接種后5d表達量達到最大,而感病品種變化并不明顯。GmMIOX4基因在抗病品種灰皮支黑豆、哈爾濱小黑豆和小粒黑豆中表達量分別在接種后5d,20d和10d顯著高于感病品種的表達量。表明GmMIOX2和GmMIOX4基因與大豆胞囊線蟲發(fā)育調控相關。通過擴增Gm MIOX基因的CDS序列,構建GFP融合表達載體p CAMBIA1303-MIOX2和p CAMBIA1303-MIOX4,農桿菌浸潤法注射本氏煙葉片進行亞細胞定位觀察,GmMIOX2蛋白主要分布在細胞膜,GmMIOX4蛋白主要分布在細胞質和細胞膜。生物信息學分析表明,GmMIOX2和GmMIOX4蛋白結構域主要由α螺旋構成,蛋白序列進化分析發(fā)現(xiàn)GmMIOX2和GmMIOX4分別與擬南芥At MIOX1、At MIOX4親緣性較近。
[Abstract]:Inositol oxygenase is usually associated with the synthesis of plant cell walls and the induction of syncytial development. In order to determine the changes of inositol oxygenase gene expression in soybean roots infected by soybean cyst nematode, the susceptible cultivar Liaodou 15, the disease-resistant variety Liaopizhi black bean, Harbin small black bean and small black bean were used as experimental materials. After inoculation of soybean cyst nematode No. 3 physiological race, real-time fluorescence quantitative PCR was used to detect the gene expression of inositol oxygenase family. The results showed that the expression of GmMIOX2 gene reached the maximum at 5 days after inoculation, while the expression of GmMIOX4 gene was not obvious in the resistant variety. The expression levels in Harbin small black bean and small black bean were significantly higher than those in susceptible varieties at 20 days and 10 days after inoculation respectively. The results showed that GmMIOX2 and GmMIOX4 genes were related to the development and regulation of soybean cyst nematode. By amplifying the CDS sequence of GM MIOX gene, the GFP fusion expression vectors p CAMBIA1303-MIOX2 and p CAMBIA1303-MIOX4 were constructed. The subcellular localization of GmMIOX2 protein was observed by Agrobacterium tumefaciens infiltration method. The GmMIOX4 protein mainly distributed in the cytoplasm and cell membrane. Bioinformatics analysis showed that the protein domains of GmMIOX2 and GmMIOX4 were mainly composed of 偽 helix. The phylogenetic analysis of GmMIOX2 and GmMIOX4 showed that GmMIOX2 and GmMIOX4 were close to Arabidopsis thaliana at MIOX4.
【作者單位】： 沈陽農業(yè)大學生物科學技術學院;黑龍江省農業(yè)科學院;沈陽農業(yè)大學植物保護學院;
【基金】：國家自然科學基金重點項目資助(31330063)
【分類號】：S435.651

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