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甘藍(lán)抗枯萎病基因FOC1植物表達(dá)載體構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化

發(fā)布時(shí)間:2018-05-12 19:34

  本文選題:甘藍(lán) + 抗枯萎病基因; 參考:《西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)》2017年03期


【摘要】:為研究甘藍(lán)枯萎病抗性基因FOC1的抗性功能,利用前期克隆的FOC1基因,以pBI121質(zhì)粒為植物表達(dá)載體,采用同源重組法構(gòu)建FOC1基因的過(guò)表達(dá)載體;將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒采用凍融法轉(zhuǎn)入根癌農(nóng)桿菌LBA4404菌株中,并通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的甘藍(lán)外植體轉(zhuǎn)化法對(duì)感病甘藍(lán)進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化,利用載體特異引物對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR鑒定。結(jié)果表明,最終成功構(gòu)建FOC1基因的過(guò)表達(dá)載體pBI121-35S-FOC1,并已成功整合到受體甘藍(lán)基因組中。
[Abstract]:In order to study the anti-function of wilt resistance gene (FOC1) in cabbage, the overexpression vector of FOC1 gene was constructed by homologous recombination method using FOC1 gene cloned in the early stage and pBI121 plasmid as plant expression vector. The constructed recombinant plasmid was transferred into Agrobacterium tumefaciens LBA4404 strain by freeze-thaw method and transformed into susceptible cabbage by Agrobacterium tumefaciens mediated explant transformation. The transgenic plants were identified by PCR using vector specific primers. The results showed that the overexpression vector pBI121-35S-FOC1 of FOC1 gene was successfully constructed and successfully integrated into the genome of the receptor cabbage.
【作者單位】: 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院;北京市農(nóng)林科學(xué)院蔬菜研究中心農(nóng)業(yè)部華北地區(qū)園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:“十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2012BAD02B01,2014BAD01B08) 國(guó)家自然科學(xué)基金(31372065) 北京市科委項(xiàng)目(Z141105002314020)~~
【分類號(hào)】:S436.35

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本文編號(hào):1879872

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