離子束重組酵母菌N6076的基因表達(dá)與蛋白質(zhì)組學(xué)初步研究
本文選題:重組酵母菌 + SSH ; 參考:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年11期
【摘要】:利用低能氮離子注入介導(dǎo)外源DNA轉(zhuǎn)化酵母菌,獲得了遺傳穩(wěn)定的產(chǎn)醌類(lèi)物質(zhì)的重組酵母菌株N6076。利用抑制差減雜交(SSH)技術(shù)從重組菌N6076的DNA中分離獲得了14個(gè)差異表達(dá)基因片斷,其中由于堿基突變?cè)斐善涞鞍踪|(zhì)氨基酸序列變化的差異表達(dá)基因有4個(gè)。這些差異表達(dá)基因的功能分別涉及遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯。應(yīng)用2-D熒光差異雙向電泳-質(zhì)譜(2-D DIGE-MS)技術(shù),在重組菌N6076中共檢測(cè)到56個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)量變化的差異點(diǎn)(p0.05),其中26個(gè)蛋白質(zhì)表達(dá)量上調(diào),編號(hào)為273和1 294的蛋白質(zhì)可信度指數(shù)分別為81.37%和12.86%。本研究為離子束重組酵母菌生物合成醌類(lèi)物質(zhì)的代謝通路研究提供了一定的幫助。
[Abstract]:A genetically stable recombinant yeast strain N6076 was obtained by using low energy nitrogen ion implantation to mediate the transformation of exogenous DNA into Saccharomyces cerevisiae. Fourteen differentially expressed gene fragments were isolated from the DNA of the recombinant strain N6076 by suppression subtractive hybridization (SSHs) technique. Among them, 4 differentially expressed genes resulted from the amino acid sequence change of the protein due to base mutation. The function of these differentially expressed genes involves the transcription and translation of genetic information, respectively. A total of 56 proteins were detected in the recombinant strain N6076 by 2-D fluorescence difference two-dimensional electrophoresis / mass spectrometry (2-D DIGE-MS) technique, among which 26 proteins were up-regulated. The protein reliability indices numbered 273 and 1 294 were 81.37% and 12.86%, respectively. This study is helpful for the study of metabolic pathway of quinone biosynthesis by recombinant yeast.
【作者單位】: 新疆大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院分子生態(tài)學(xué)研究室;新疆大學(xué)物理科學(xué)與技術(shù)學(xué)院離子束生物技術(shù)中心;西安工業(yè)大學(xué)離子束生物工程與生物多樣性研究中心;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(No.11575149;No.31360131) 陜西省社會(huì)發(fā)展科技攻關(guān)項(xiàng)目(2016SF-450)共同資助
【分類(lèi)號(hào)】:Q51;Q78
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