發(fā)布時間：2018-04-20 11:54

  本文選題：大豆 + Cry-like基因　； 參考：《中國油料作物學報》2017年02期

【摘要】：利用無縫克隆技術把抗蟲基因Cry8-like重組到pCAMBIA3301載體上,成功構建了含有抗草銨膦篩選標記的植物表達載體pCAMBIA3301-RSP-Cry8-like-nos。將該載體通過農(nóng)桿菌介導法轉入兩個受體大豆品種吉農(nóng)28和吉農(nóng)42中,經(jīng)PCR檢測,吉農(nóng)28和吉農(nóng)42分別獲得了17株和13株T_1陽性植株,36株和25株T_2陽性植株。T_2轉基因植株Southern雜交結果顯示,目的基因以單拷貝的形式整合到大豆基因組中。熒光定量PCR檢測結果表明,Cry8-like在轉基因植株幼根得到了表達,而非轉化受體對照未檢測到熒光信號。室內(nèi)抗暗黑鰓金龜幼蟲鑒定結果表明,轉基因植株提高了抗暗黑鰓金龜幼蟲的能力。
[Abstract]:A plant expression vector pCAMBIA3301-RSP-Cry8-like-nos was successfully constructed by means of seamless cloning of the insect-resistant gene Cry8-like into the pCAMBIA3301 vector, and the plant expression vector pCAMBIA3301-RSP-Cry8-like-nos was successfully constructed. The vector was transferred by Agrobacterium tumefaciens into two recipient soybean varieties, Jinong 28 and Jinong 42, and detected by PCR. The results of Southern hybridization of 17 and 13 TST-1 positive plants and 25 T2 positive plants respectively showed that the target gene was integrated into soybean genome in the form of single copy. Fluorescence quantitative PCR analysis showed that Cry8-like was expressed in the young roots of transgenic plants, but no fluorescence signal was detected in non-transformed receptor control. The results of laboratory identification showed that transgenic plants could improve the ability of larva resistance.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學生命科學學院;吉林農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院;
【基金】：轉基因生物新品種培育重大專項(2016ZX08004-004-003)
【分類號】：S435.651

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本文編號：1777638