本文選題：心肌細胞 + RNA干擾��； 參考：《畜牧與獸醫(yī)》2017年08期

【摘要】：為了研究H9c2心肌細胞RNA干擾的轉染條件,篩選結構型熱休克蛋白70(Hsc70)干擾序列,采用流式細胞儀和Western blot方法,研究不同劑量比例熒光標記的siRNA(FAM-siRNA)和不同濃度脂質體2000(Lipofectamine 2000)對轉染效率的影響,進一步篩選Hsc70 siRNA的最佳沉默序列。結果顯示:流式細胞儀試驗得出的最佳轉染條件為80 nmol/L FAM-siRNA+1.5μL Lipofectamine 2000;Western blot結果表明,Oligo 2、Oligo 3和Oligo 4組中的Hsc70蛋白表達極顯著降低(P0.01),其中Oligo 3組的沉默效率最高;轉染后48 h收獲細胞為最佳轉染時間。結果表明:80 nmol/L FAM-siRNA+1.5μL Lipofectamine 2000為最佳轉染條件,以Oligo 3為最佳RNA干擾靶基因。
[Abstract]:In order to study the transfection conditions of RNA interference in H9c2 cardiomyocytes, the interference sequence of structural heat shock protein 70 (Hsc70) was screened by flow cytometry and Western blot.The effects of fluorescent labeled siRNA-FAM-siRNAs and liposome 2000(Lipofectamine 2000) on transfection efficiency were studied, and the best silencing sequence of Hsc70 siRNA was screened.The results showed that the optimal transfection conditions were 80 nmol/L FAM-siRNA 1.5 渭 L Lipofectamine 2000 Western blot. The results showed that the expression of Hsc70 protein in Oligo 2 oligo 3 and Oligo 4 groups was significantly decreased, and the silencing efficiency of Oligo 3 group was the highest.The best transfection time was 48 h after transfection.The results showed that 2000 nmol/L FAM-siRNA 1.5 渭 L Lipofectamine 2000 was the best transfection condition and Oligo 3 was the best target gene for RNA interference.
【作者單位】： 福建龍巖學院生命科學學院;南京農業(yè)大學動物醫(yī)學院;
【基金】：農業(yè)部公益性行業(yè)(農業(yè))專項子項目(201003060-11) 福建龍巖學院博士啟動項目(LB2014003)
【分類號】：S852.3

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本文編號：1753062