本文選題：非小細(xì)胞肺癌 + A細(xì)胞��； 參考：《中國腫瘤生物治療雜志》2016年04期

【摘要】：目的:研究橋接整合因子1(bridging intergrator-1,Bin1)基因過表達對非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響,并初步探討其作用機制。方法:通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù),利用陽離子脂質(zhì)體將含有人全長Bin1基因序列的真核表達質(zhì)粒CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1轉(zhuǎn)染到A549細(xì)胞株,分別設(shè)置空白對照組及空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組,利用RT-PCR和Western blotting分別檢測各處理組細(xì)胞中Bin1基因和蛋白表達水平。通過細(xì)胞劃痕實驗、Transwell侵襲實驗分別檢測Bin1過表達對A549細(xì)胞遷移、侵襲能力的影響;Western blotting實驗檢測Bin1過表達對A549細(xì)胞內(nèi)NF-κB磷酸化水平和遷移相關(guān)蛋白E-鈣黏著蛋白、N-鈣黏著蛋白、MMP-9表達水平的影響。結(jié)果:與空白對照組和空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組相比,Bin1轉(zhuǎn)染組A549細(xì)胞中Bin1基因和蛋白表達水平均明顯升高(P0.05);Bin1轉(zhuǎn)染組細(xì)胞遷移、侵襲能力均較空白質(zhì)粒組和空白對照組明顯下降[穿膜細(xì)胞數(shù):(50.50±3.15)vs(124.00±4.25),(130.00±4.37)個;均P0.05];與空白轉(zhuǎn)染組和空白對照組相比,Bin1轉(zhuǎn)染組細(xì)胞內(nèi)NF-κB表達水平明顯上調(diào)(P0.05)而p-NF-κB表達明顯下調(diào)(P0.05),N-鈣黏著蛋白、MPP-9明顯下調(diào)(P0.05),E-鈣黏著蛋白明顯上調(diào)(P0.05)。結(jié)論:Bin1過表達可以抑制A549細(xì)胞的遷移及侵襲能力,其機制可能與NF-κB途徑的失活及細(xì)胞遷移侵襲相關(guān)蛋白表達變化有關(guān)。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of overexpression of 1(bridging intergrator-1 Bin1 gene on the migration and invasion of non-small cell lung cancer cell line A549, and to explore its mechanism.Methods: the eukaryotic expression plasmid CMV-MCS-GFP-SV40-Neomycin-Bin1 containing human full-length Bin1 gene sequence was transfected into A549 cell line with cationic liposome by gene transfection technique. Blank control group and empty plasmid transfection group were set up respectively.RT-PCR and Western blotting were used to detect the expression of Bin1 gene and protein respectively.The overexpression of Bin1 in A549 cells was detected by cell scratch assay and Transwell invasion assay.The effect of overexpression of Bin1 on the phosphorylation of NF- 魏 B and the expression of E-cadherin and MMP-9 in A549 cells were detected by Western blotting assay.Results: compared with the blank control group and the empty plasmid transfection group, the expression of Bin1 gene and protein in the A549 cells of the BIN1 transfection group were significantly higher than those in the P0.05BIN1 transfection group.The invasiveness was significantly lower than that in the blank plasmid group and the blank control group [the number of perforating cells was 50.50 鹵4.25 3.15)vs(124.00 鹵4.25, 130.00 鹵4.37].Compared with the blank transfection group and the blank control group, the expression level of NF- 魏 B increased significantly (P0.05), and the expression of p-NF- 魏 B down-regulated the expression of P0.05N- calcitonin (MPP-9) down-regulated the expression of P0.05- E-cadherin.Conclusion the overexpression of BIN1 can inhibit the migration and invasion ability of A549 cells, and its mechanism may be related to the inactivation of NF- 魏 B pathway and the changes of cell migration and invasion related protein expression.
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院生物治療科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金資助項目(No.81201607) 河北省杰出青年基金資助項目(No.H2014206320) 河北省高層次人才培養(yǎng)項目資助(No.A201401040)~~
【分類號】：R734.2

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