本文選題：α-淀粉酶抑制劑 + 原核表達　； 參考：《核農(nóng)學報》2017年05期

【摘要】：為研究鷹嘴豆種子中新貯藏蛋白類型α-淀粉酶抑制劑CL-AI的抑制活性、生物活性以及三級結(jié)構(gòu),本研究利用前期克隆的α-淀粉酶抑制劑基因CL-AI及其2個亞基CL-AI-α、CL-AI-β分別構(gòu)建原核表達載體p E-SUMO3,經(jīng)誘導表達獲得了CL-AI、CL-AI-α的可溶性融合蛋白和CL-AI-β包涵體融合蛋白,其中CL-AI-β通過構(gòu)建含不同標簽的表達載體,最終實現(xiàn)了可溶性表達。人唾液淀粉酶(HSA)抑制活性試驗結(jié)果表明,CL-AI,CL-AI-α,CL-AI-β3個蛋白對HAS都有一定的抑制作用。發(fā)芽試驗表明,CL-AI蛋白對小麥、玉米、水稻種子發(fā)芽過程中的發(fā)芽勢、根長和芽長影響顯著,與加入無菌水的處理相比,種子的簡化活力指數(shù)顯著下降。本研究結(jié)果為CL-AI蛋白的后續(xù)研究與應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
[Abstract]:In order to study the inhibitory activity, biological activity and tertiary structure of 偽 -amylase inhibitor CL-AI, a new type of storage protein in chickpea seeds,In this study, the prokaryotic expression vector pE-SUMO3 was constructed by using the previously cloned 偽 -amylase inhibitor gene CL-AI and its two subunits, CL-AI- 偽 and CL-AI- 尾, respectively. The soluble fusion protein and CL-AI- 尾 inclusion body fusion protein of CL-AICL-AI- 偽 and CL-AI- 尾 inclusion body fusion protein were obtained by induction expression.CL-AI- 尾 was finally expressed in soluble form by constructing expression vector containing different tags.Human salivary amylase (HSA) inhibitory activity test showed that CL-AI- 偽 CL-AI- 尾 3 proteins could inhibit HAS to some extent.Germination test showed that CL-AI protein had a significant effect on germination potential, root length and bud length of wheat, maize and rice seeds during germination. Compared with the treatment of aseptic water, the simplified vigor index of seeds decreased significantly.The results of this study laid a foundation for the further study and application of CL-AI protein.
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學作物遺傳與種質(zhì)創(chuàng)新國家重點實驗室;新疆農(nóng)業(yè)大學干旱區(qū)荒漠研究所;新疆農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院;
【基金】：國家自然科學基金(30960206;31160306)
【分類號】：S529

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本文編號：1734419