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人乳腺癌中VWCE基因的表達(dá)及其功能研究

發(fā)布時間:2018-03-29 04:39

  本文選題:乳腺腫瘤 切入點(diǎn):von 出處:《腫瘤》2017年07期


【摘要】:目的 :探討人乳腺癌組織中VWCE(von Willebrand factor C and epidermal growth factor domains)基因的表達(dá)情況,以及其過表達(dá)對乳腺癌細(xì)胞體外增殖和遷移能力的影響。方法:采用實(shí)時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法分別檢測36例乳腺癌組織及其癌旁正常組織和5種乳腺癌細(xì)胞系中VWCE的表達(dá)情況。構(gòu)建VWCE基因過表達(dá)的重組慢病毒,將其感染乳腺癌MCF-7和SK-BR-3細(xì)胞后,采用實(shí)時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法驗(yàn)證VWCE過表達(dá)。分別采用CCK-8和Transwell小室法檢測VWCE過表達(dá)對乳腺癌MCF-7和SK-BR-3細(xì)胞增殖和遷移能力的影響。結(jié)果:乳腺癌組織中VWCE mRNA的高表達(dá)率明顯低于癌旁組織(22%vs78%,P0.05),并與原發(fā)腫瘤分期明顯相關(guān)(P0.05);乳腺癌組織中VWCE蛋白的平均表達(dá)水平也明顯低于癌旁組織(P0.05)。5種乳腺癌細(xì)胞系中VWCE mRNA和蛋白的表達(dá)水平均低于永生化乳腺上皮細(xì)胞系(P值均0.05)。將VWCE基因過表達(dá)重組病毒感染內(nèi)源性VWCE低表達(dá)的乳腺癌MCF-7和SK-BR-3細(xì)胞后,2種細(xì)胞中VWCE蛋白均高表達(dá)(P值均0.05),細(xì)胞增殖和遷移能力均明顯降低(P值均0.05)。結(jié)論:VWCE在乳腺癌組織和細(xì)胞中均低表達(dá)。VWCE過表達(dá)可以抑制乳腺癌細(xì)胞的體外增殖和遷移。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of VWCE(von Willebrand factor C and epidermal growth factor domain in human breast cancer. Methods: Real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting were used to detect 36 breast cancer tissues and their adjacent normal tissues and 5 kinds of breast cancer fine tissues, respectively. Construction of recombinant lentivirus with overexpression of VWCE gene, After it was infected with MCF-7 and SK-BR-3 cells of breast cancer, VWCE overexpression was verified by real-time fluorescent quantitative PCR and Western blot. The effect of VWCE overexpression on the proliferation and migration of MCF-7 and SK-BR-3 cells in breast cancer was detected by CCK-8 and Transwell chamber assay respectively. Results: VWCE mRNA was detected in breast cancer tissues. The high expression rate of VWCE protein in breast cancer tissues was significantly lower than that in adjacent tissues (22 vs 78), and was significantly correlated with the stage of primary tumor. The average expression level of VWCE protein in breast cancer tissues was also significantly lower than that in P0.05- 5 breast cancer cell lines adjacent to the cancer tissues. The expression of VWCE mRNA and protein in breast cancer cell lines was also significantly lower than that in breast cancer cell lines. The average P value was lower than that of immortalized mammary epithelial cell line (P = 0.05). The expression of VWCE protein in breast cancer MCF-7 and SK-BR-3 cells with low expression of endogenous VWCE was higher than that of immortalized breast epithelial cell line (P < 0.05), cell proliferation and migration were observed. Conclusion the overexpression of VWCE in breast cancer tissues and cells can inhibit the proliferation and migration of breast cancer cells in vitro.
【作者單位】: 廣東醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;深圳市第二人民醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:深圳市國際合作研究項(xiàng)目(編號:GJHZ20160301163138685)~~
【分類號】:R737.9

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