本文選題：柔嫩艾美耳球蟲　切入點(diǎn)：表面抗原　出處：《動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》2017年07期

【摘要】：為進(jìn)一步研究柔嫩艾美耳球蟲表面抗原蛋白,應(yīng)用RT-PCR從柔嫩艾美耳球蟲第2代裂殖子總RNA擴(kuò)增表面抗原基因SAG19(Q70CD0)和SAGfm(U6L233),與pGEM-T easy載體連接,擴(kuò)增目的片段后分別雙酶切擴(kuò)增產(chǎn)物與pET-28a(+),連接轉(zhuǎn)化至BL21后,誘導(dǎo)表達(dá),分別獲得兩種重組蛋白。SDSPAGE結(jié)果表明,兩種重組蛋白的分子質(zhì)量均為32ku,為包涵體蛋白形式。分別以感染柔嫩艾美耳球蟲的雞血清和重組蛋白免疫新西蘭大白兔獲得的多克隆抗體作為一抗,經(jīng)Western blot分析,結(jié)果表明重組蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。通過對這兩種表面抗原基因的研究,為基因工程疫苗的研究提供一定的理論依據(jù)。
[Abstract]:In order to further study the surface antigen protein of Eimeria tenella, the surface antigen genes SAG19, Q70CD0) and SAGfmU6L233G were amplified from the total RNA of the second generation of Eimeria tenella by RT-PCR and ligated with pGEM-T easy vector. After amplification of the target fragment, the amplified product was digested with pET-28a (pET-28a) and transformed into BL21, then induced to express, and two kinds of recombinant protein 路SDS-PAGE were obtained, respectively. The molecular weight of the two recombinant proteins is 32ku. they are in the form of inclusion body proteins. The polyclonal antibodies obtained from chicken serum infected with Eimeria tenella and recombinant proteins immunized with New Zealand white rabbits were used as primary antibodies, respectively, and analyzed by Western blot. The results showed that the recombinant protein had good immunogenicity and antigenicity.
【作者單位】： 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所/中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院獸藥安全評價與獸藥殘留研究重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室/農(nóng)業(yè)部動物寄生蟲病學(xué)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31272607)
【分類號】：S852.723

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本文編號：1669961