發(fā)布時(shí)間：2018-03-26 12:29

  本文選題：干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白(IFITM)　切入點(diǎn)：真核表達(dá)載體　出處：《黑龍江畜牧獸醫(yī)》2017年09期

【摘要】：為了研究番鴨干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白3(Interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)在抗病毒感染過(guò)程中的作用,試驗(yàn)采用PCR擴(kuò)增、酶切、連接、轉(zhuǎn)化和質(zhì)粒提取等方法,將番鴨IFITM3基因構(gòu)建到真核表達(dá)載體p Flag-CMV-5a上。測(cè)序正確的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,運(yùn)用RT-PCR和Western-blot方法鑒定IFITM3的表達(dá)情況。結(jié)果表明:構(gòu)建的p Flag-CMV-Anas-IFITM3真核表達(dá)載體在293T細(xì)胞中可以進(jìn)行mRNA的正常轉(zhuǎn)錄和蛋白的大量表達(dá)。說(shuō)明番鴨IFITM3基因成功構(gòu)建到p Flag-CMV-5a真核表達(dá)載體上,可以在293T模式細(xì)胞中大量表達(dá)番鴨IFITM3蛋白,并對(duì)該蛋白的抗病毒功能和分子機(jī)制進(jìn)行研究。
[Abstract]:In order to study the role of muscovy duck interferon induced transmembrane protein 3(Interferon-induced transmembrane protein 3 IFITM3 in the process of antiviral infection, PCR amplification, restriction endonuclease digestion, ligation, transformation and plasmid extraction were used. The IFITM3 gene of muscovy duck was constructed into eukaryotic expression vector p Flag-CMV-5a. The correctly sequenced plasmid was transfected into 293T cells. RT-PCR and Western-blot methods were used to identify the expression of IFITM3. The results showed that the constructed eukaryotic expression vector of p Flag-CMV-Anas-IFITM3 could carry out the normal transcription of mRNA and the high expression of protein in 293T cells, which indicated that the IFITM3 gene of muscovy duck was successfully constructed into p Flag-CMV-5a. Eukaryotic expression vector, The muscovy duck IFITM3 protein can be expressed in 293T model cells and its antiviral function and molecular mechanism are studied.
【作者單位】： 福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;
【基金】：福建省教育廳省屬高校專項(xiàng)項(xiàng)目(JK2015011) 福建省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(2016J01090)
【分類號(hào)】：Q78;S834

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本文編號(hào)：1667910