本文選題：siRNA傳遞　切入點：跨界基因沉默菌株　出處：《湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報》2017年05期

【摘要】："跨界基因沉默"是一種利用大腸桿菌在哺乳動物細胞中傳遞小干擾RNA并引起基因沉默的新穎技術(shù),具有實用、穩(wěn)定和低成本等優(yōu)點.該技術(shù)通過構(gòu)建一種能轉(zhuǎn)錄出短發(fā)夾RNA(shRNA)的大腸桿菌,而這種大腸桿菌產(chǎn)生的shRNA能靶向哺乳動物細胞中的特定基因,從而引發(fā)RNA干擾(RNAi).本文用RecA同源重組的方法將跨界基因沉默質(zhì)粒的工作元件快速地整合到大腸桿菌的染色體DNA上,構(gòu)建了跨界基因沉默菌株.通過吖啶橙染色實驗證明了跨界基因沉默菌株能夠入侵哺乳動物細胞,最后Western blot結(jié)果表明跨界基因沉默菌株可以對靶標(biāo)基因產(chǎn)生干擾作用.該技術(shù)的完善將進一步促進工程菌的研發(fā)和利用.
[Abstract]:"Transboundary gene silencing" is a novel technique that uses Escherichia coli to transmit small interfering RNA and cause gene silencing in mammalian cells. The technique is based on the construction of a Escherichia coli that transcribes short hairpin RNAs that produce shRNA that targets specific genes in mammalian cells. In this paper, the working elements of transborder gene silencing plasmids were quickly integrated into the chromosome DNA of E. coli by RecA homologous recombination. The transborder gene silencing strain was constructed, and it was proved by acridine orange staining that the transborder gene silencing strain could invade mammalian cells. Finally, the results of Western blot showed that the transborder gene silencing strain could interfere with the target gene, and the improvement of the technique would further promote the development and utilization of engineering bacteria.
【作者單位】： 湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院動物多肽藥物創(chuàng)制國家地方聯(lián)合工程實驗室;湖南中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(30972624) 湖南省教育廳科學(xué)研究項目(15C0840) 湖南省生物發(fā)育工程及新產(chǎn)品研發(fā)協(xié)同創(chuàng)新中心(20134486)
【分類號】：Q78

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本文編號：1657932