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IGF2基因印記丟失對(duì)胚胎干細(xì)胞向胰島樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-03-21 05:53

  本文選題:胚胎干細(xì)胞 切入點(diǎn):基因組印跡 出處:《中國(guó)組織工程研究》2017年09期  論文類型:期刊論文


【摘要】:背景:IGF2是一種重要的胚胎有絲分裂生長(zhǎng)促進(jìn)因子,在維持細(xì)胞正常生長(zhǎng)過程中起關(guān)鍵作用,其基因表達(dá)以基因組印跡方式受表觀遺傳調(diào)控。當(dāng)IGF2發(fā)生印跡丟失時(shí),與個(gè)體的非正常發(fā)育以及腫瘤發(fā)生存在一些聯(lián)系。目的:探討IGF2基因發(fā)生印記丟失對(duì)小鼠胚胎干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為胰島樣細(xì)胞的影響。方法:體外誘導(dǎo)2種小鼠胚胎干細(xì)胞(SF1-G和SF1-1)向胰島樣細(xì)胞分化;Real-Time PCR和細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)Insulin基因的表達(dá);聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性內(nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)檢測(cè)印跡基因IGF2在誘導(dǎo)分化前后細(xì)胞中的親本表達(dá);體外胰島素釋放實(shí)驗(yàn)檢測(cè)誘導(dǎo)終末細(xì)胞的胰島素釋放水平。結(jié)果與結(jié)論:(1)IGF2基因印記正常(SF1-G)和印記丟失(SF1-1)的2種小鼠胚胎干細(xì)胞在誘導(dǎo)分化前后印跡狀態(tài)沒有發(fā)生改變;(2)在誘導(dǎo)的終末細(xì)胞中,盡管2種細(xì)胞的胰島素釋放水平差異無顯著性意義,但是Insulin基因在SF1-1組中的表達(dá)水平要高于其在SF1-G組的表達(dá)水平;(3)IGF2基因印記丟失可能與誘導(dǎo)分化來源的終末細(xì)胞中Insulin基因的表達(dá)上調(diào)相關(guān)。
[Abstract]:Background: IGF2 is an important growth promoter of embryonic mitosis, which plays a key role in maintaining normal cell growth. Its gene expression is regulated by epigenetic imprinting. When IGF2 is lost, its gene expression is regulated by epigenetic imprinting. Objective: to investigate the effect of loss of IGF2 gene imprinting on the directional differentiation of mouse embryonic stem cells into islet like cells. Methods: two kinds of small cells were induced in vitro. Murine embryonic stem cells (SF1-G and SF1-1) differentiated into islet like cells with Real-Time PCR and immunofluorescence assay to detect the expression of Insulin gene. Polymerase chain reaction-restriction endonuclease fragment length polymorphism (PCR-RFLP) was used to detect the parental expression of imprinted gene IGF2 in cells before and after differentiation. In vitro insulin release assay was used to detect the level of insulin release in the induced terminal cells. Results and conclusion the two mouse embryonic stem cells with normal and lost imprinting of IGF2 gene were not imprinted before and after differentiation. In induced terminal cells, Although there was no significant difference in insulin release between the two cells, However, the expression level of Insulin gene in SF1-1 group was higher than that in SF1-G group. The loss of Insulin gene imprinting may be related to the up-regulation of Insulin gene expression in the terminal cells derived from induced differentiation.
【作者單位】: 深圳市光明新區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)分泌科;南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科;南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部;
【基金】:江西省教育廳科技項(xiàng)目(GJJ13142)~~
【分類號(hào)】:R329.2

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本文編號(hào):1642539

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