本文選題：胚胎干細胞　切入點：基因組印跡　出處：《中國組織工程研究》2017年09期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:IGF2是一種重要的胚胎有絲分裂生長促進因子,在維持細胞正常生長過程中起關(guān)鍵作用,其基因表達以基因組印跡方式受表觀遺傳調(diào)控。當IGF2發(fā)生印跡丟失時,與個體的非正常發(fā)育以及腫瘤發(fā)生存在一些聯(lián)系。目的:探討IGF2基因發(fā)生印記丟失對小鼠胚胎干細胞定向誘導分化為胰島樣細胞的影響。方法:體外誘導2種小鼠胚胎干細胞(SF1-G和SF1-1)向胰島樣細胞分化;Real-Time PCR和細胞免疫熒光檢測Insulin基因的表達;聚合酶鏈式反應-限制性內(nèi)切酶片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)檢測印跡基因IGF2在誘導分化前后細胞中的親本表達;體外胰島素釋放實驗檢測誘導終末細胞的胰島素釋放水平。結(jié)果與結(jié)論:(1)IGF2基因印記正常(SF1-G)和印記丟失(SF1-1)的2種小鼠胚胎干細胞在誘導分化前后印跡狀態(tài)沒有發(fā)生改變;(2)在誘導的終末細胞中,盡管2種細胞的胰島素釋放水平差異無顯著性意義,但是Insulin基因在SF1-1組中的表達水平要高于其在SF1-G組的表達水平;(3)IGF2基因印記丟失可能與誘導分化來源的終末細胞中Insulin基因的表達上調(diào)相關(guān)。
[Abstract]:Background: IGF2 is an important growth promoter of embryonic mitosis, which plays a key role in maintaining normal cell growth. Its gene expression is regulated by epigenetic imprinting. When IGF2 is lost, its gene expression is regulated by epigenetic imprinting. Objective: to investigate the effect of loss of IGF2 gene imprinting on the directional differentiation of mouse embryonic stem cells into islet like cells. Methods: two kinds of small cells were induced in vitro. Murine embryonic stem cells (SF1-G and SF1-1) differentiated into islet like cells with Real-Time PCR and immunofluorescence assay to detect the expression of Insulin gene. Polymerase chain reaction-restriction endonuclease fragment length polymorphism (PCR-RFLP) was used to detect the parental expression of imprinted gene IGF2 in cells before and after differentiation. In vitro insulin release assay was used to detect the level of insulin release in the induced terminal cells. Results and conclusion the two mouse embryonic stem cells with normal and lost imprinting of IGF2 gene were not imprinted before and after differentiation. In induced terminal cells, Although there was no significant difference in insulin release between the two cells, However, the expression level of Insulin gene in SF1-1 group was higher than that in SF1-G group. The loss of Insulin gene imprinting may be related to the up-regulation of Insulin gene expression in the terminal cells derived from induced differentiation.
【作者單位】： 深圳市光明新區(qū)人民醫(yī)院內(nèi)分泌科;南昌大學第一附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科;南昌大學第一附屬醫(yī)院藥學部;
【基金】：江西省教育廳科技項目(GJJ13142)~~
【分類號】：R329.2

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本文編號：1642539