本文選題：雌激素　切入點(diǎn)：骨質(zhì)疏松　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:1、觀察雌激素對(duì)去卵巢大鼠骨密度的影響;2、觀察雌激素對(duì)去卵巢大鼠脛骨Atg5、Atg7、Ulk1和p62 m RNA表達(dá)的影響,探究雌激素是否改變大鼠自噬水平從而影響大鼠骨量。方法:將27只6月齡,體重約250±20g的SD(Sprague-Dawley)雌性大鼠隨機(jī)分為去卵巢組18只及假手術(shù)組(Sham)9只,去卵巢組再隨機(jī)平均分為單純?nèi)ヂ殉步M(OVX)和雌激素干預(yù)組(E2)。雌激素組(E2)每周用雌二醇0.1mg/kg肌肉注射;去卵巢組(OVX)與假手術(shù)組(Sham)每周等量生理鹽水肌肉注射。干預(yù)24周。每組隨機(jī)選取三只大鼠于干預(yù)前、干預(yù)后采用雙能X線測(cè)量骨密度,同時(shí)于干預(yù)后取左側(cè)脛骨骨組織制作HE染色病理切片,于光學(xué)顯微鏡下觀察并用圖像分析軟件統(tǒng)計(jì)各組骨量;各組剩余6只大鼠,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR法)檢測(cè)左側(cè)脛骨骨組織Atg5、Atg7、Ulk1和p62 m RNA表達(dá)水平并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)比較。結(jié)果:1、干預(yù)前,各組大鼠體重及骨密度均無(wú)明顯差異(P0.05)。干預(yù)六個(gè)月后,各組大鼠的體重均明顯增加,OVX組體重升高更顯著(P0.01),E2組大鼠與Sham組大鼠體重?zé)o明顯差異(P0.05)。2、干預(yù)前,各組大鼠全身BMD無(wú)明顯差異(P0.05)。干預(yù)六個(gè)月后,OVX組大鼠全身BMD顯著低于Sham組、E2組大鼠(P0.05);而E2組與Sham組大鼠全身BMD差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。而在顯微鏡下觀察骨組織HE染色病理切片發(fā)現(xiàn)Sham組及E2組骨小梁致密程度明顯優(yōu)于OVX組,Sham組與E2組差異不明顯。圖像分析各組骨小梁面積占骨髓腔比例提示,OVX組明顯低于Sham組與E2組(P0.01)。3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示:OVX組Atg5、Ulk1 m RNA表達(dá)量較Sham組、E2組顯著升高(p0.01);Atg7 m RNA表達(dá)量較Sham組、E2組增高,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);p62 m RNA表達(dá)量較Sham組降低,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而與E2組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。E2組與Sham組之間的對(duì)照,Atg5、Atg7、Ulk1與p62 m RNA的表達(dá)量差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、建立去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松模型成功;2、去卵巢大鼠體內(nèi)自噬水平升高,雌激素逆轉(zhuǎn)升高的自噬水平,改善骨質(zhì)疏松。
[Abstract]:Objective to observe the effect of estrogen on bone mineral density (BMD) of ovariectomized rats and to observe the effect of estrogen on the expression of Ulk1 and p62m RNA in the tibia of ovariectomized rats. Methods: 27 SD Sprague-Dawley rats aged 6 months and weighing about 250 鹵20g were randomly divided into ovariectomized group (n = 18) and sham-operated group (n = 9). The ovariectomized group was randomly divided into ovariectomized group (OVX) and estrogen intervention group (estradiol 0.1 mg / kg / week). Ovariectomized group (OVX) and sham-operated group (Sham) were injected intramuscularly with normal saline every week for 24 weeks. Three rats in each group were randomly selected before and after intervention, bone mineral density was measured by dual energy X-ray. At the same time, the left tibia bone tissue was taken from the left tibia bone to make HE staining pathological sections, observed under optical microscope and used image analysis software to count the bone mass of each group, the remaining 6 rats in each group, The expression levels of Atg5, Atg7 Ulk1 and p62 m RNA in the left tibial bone tissue were detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR). Results: before intervention, there was no significant difference in body weight and bone mineral density in each group. Six months after intervention, there was no significant difference in body weight and bone mineral density. There was no significant difference in body weight between the E2 group and the Sham group. There was no significant difference in total body BMD in each group (P 0.05). After six months of intervention, the total body BMD in OVX group was significantly lower than that in Sham group E 2 group (P 0.05), but there was no significant difference between E 2 group and Sham group in the whole body BMD. The HE staining of bone tissue was observed under microscope. Color pathological section showed that the density of trabecula in Sham group and E2 group was significantly better than that in OVX group Sham group and E2 group. Image analysis showed that the ratio of bone trabecular area to medullary cavity in each group was significantly lower than that in Sham group and E2 group, and real-time fluorescence was observed. The results of light quantitative PCR showed that the expression of Atg5 Ulk1 m RNA in OVX group was significantly higher than that in E2 group of Sham group, and the expression of RNA at 7 m in Sham group was significantly higher than that in Sham group. The expression of p62m RNA in P0.05 was significantly lower than that in Sham group. There was no significant difference between E2 group and E2 group. There was no significant difference between E2 group and Sham group. There was no significant difference in the expression of Atg5Ag 7 Ulk1 and p62 m RNA between E 2 group and E 2 group. Conclusion 1: 1, the ovariectomized rat model of osteoporosis was established successfully. The level of autophagy in ovariectomized rats was increased. Estrogen reverses elevated autophagy levels and improves osteoporosis.
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R580

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本文編號(hào)：1642918