本文選題：pGH基因　切入點(diǎn)：轉(zhuǎn)基因豬　出處：《中國(guó)獸醫(yī)雜志》2017年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：本試驗(yàn)采用組織塊貼壁法對(duì)初生仔豬的耳組織進(jìn)行原代培養(yǎng),成功分離出轉(zhuǎn)pGH基因豬與非轉(zhuǎn)基因豬成纖維細(xì)胞,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,凍存前和復(fù)蘇后細(xì)胞活力檢測(cè),生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)分析,波形蛋白免疫組化,染色體計(jì)數(shù)以及微生物污染檢測(cè)等生物學(xué)特性分析。結(jié)果表明,原代細(xì)胞經(jīng)過胰蛋白酶消化和差速離心分離培養(yǎng)出成纖維細(xì)胞,7組細(xì)胞凍存前細(xì)胞活力均在為92%以上,凍存3個(gè)月后細(xì)胞復(fù)蘇活力仍在89%以上;細(xì)胞生長(zhǎng)總趨勢(shì)呈"S"型,即經(jīng)歷了潛伏期、指數(shù)生長(zhǎng)期和平臺(tái)期3個(gè)階段;細(xì)胞波形蛋白免疫組化在成纖維細(xì)胞中呈陽性反應(yīng);染色體計(jì)數(shù)結(jié)果表明,染色體數(shù)量穩(wěn)定;成纖維細(xì)胞的細(xì)菌、真菌、病毒和支原體檢測(cè)均為陰性。本試驗(yàn)成功建立了轉(zhuǎn)pGH基因豬與非轉(zhuǎn)基因豬成纖維細(xì)胞系。
[Abstract]:The primary culture of the ear tissue of the newborn piglets was carried out by tissue mass adherence method. The fibroblasts were isolated successfully from pigs with pGH gene and non-transgenic pigs. The morphology of the cells was observed and the viability of the cells before and after cryopreservation and resuscitation was detected. Growth kinetics analysis, vimentin immunohistochemistry, chromosome count and microbial contamination analysis. After trypsin digestion and differential centrifugation, the viability of fibroblasts in the 7 groups was above 92% before freezing, and the resuscitation activity was still over 89% after 3 months of cryopreservation, and the general trend of cell growth was "S" type. The results of chromosome count showed that the number of chromosomes was stable, the number of chromosomes was stable, the bacteria and fungi of fibroblasts, Both virus and mycoplasma were negative. In this experiment, pGH gene transgenic porcine and non-transgenic pig fibroblast cell lines were successfully established.
【作者單位】： 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)(2016ZX08006-003) 山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)項(xiàng)目(SDAIT-08-13)
【分類號(hào)】：S828

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本文編號(hào)：1642428