本文選題：膠質(zhì)瘤　切入點(diǎn)：miR-b　出處：《廈門大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為探討miR-193b對人膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞的遷移和侵襲能力的影響,利用HiPerFect轉(zhuǎn)染試劑瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-193b模擬物(mimics)上調(diào)U251細(xì)胞中miR-193b的表達(dá),通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)檢測其轉(zhuǎn)染效率,然后進(jìn)行細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)及侵襲實(shí)驗(yàn),分別檢測miR-193b對U251細(xì)胞遷移及侵襲能力的影響.結(jié)果顯示過表達(dá)miR-193b可抑制U251細(xì)胞遷移和侵襲的能力.應(yīng)用生物信息學(xué)軟件預(yù)測,提示單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7(MCT7)基因可能是miR-193b的潛在靶基因.進(jìn)而構(gòu)建雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)從轉(zhuǎn)錄水平上證明MCT7為miR-193b調(diào)控的靶基因;qRT-PCR及蛋白質(zhì)免疫印記(Western blot)分別在mRNA和蛋白水平上進(jìn)一步證明MCT7基因的表達(dá)受miR-193b的負(fù)調(diào)控.由此可見,miR-193b很可能通過負(fù)向調(diào)控MCT7基因的表達(dá)來抑制U251細(xì)胞的遷移與侵襲.
[Abstract]:In order to investigate the effect of miR-193b on the migration and invasion of human glioma U251 cells, transient transfection of miR-193b mimicswith HiPerFect transfection reagent was used to up-regulate the expression of miR-193b in U251 cells. The transfection efficiency was detected by real-time fluorescence quantitative PCR qRT-PCR. The effects of miR-193b on the migration and invasion of U251 cells were examined by cell scratch assay and invasion assay. The results showed that overexpression of miR-193b could inhibit the migration and invasion of U251 cells. Bioinformatics software was used to predict the effect of miR-193b on the migration and invasion of U251 cells. It is suggested that monocarboxylate transporter 7hmCT7) gene may be a potential target gene of miR-193b. Furthermore, the construction of double luciferase reporter gene system at the transcriptional level proves that MCT7 is the target gene regulated by miR-193b, qRT-PCR and Western blot of protein imprinting are found in mRNA respectively. It is further demonstrated that the expression of MCT7 gene is negatively regulated by miR-193b, which suggests that the expression of MCT7 gene may inhibit the migration and invasion of U251 cells by negatively regulating the expression of MCT7 gene.
【作者單位】： 廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科;
【基金】：廈門市科技惠民計(jì)劃項(xiàng)目(2013S0001)
【分類號(hào)】：R739.41

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本文編號(hào)：1641513