本文選題：微小RNA-　切入點(diǎn)：A細(xì)胞　出處：《環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)》2017年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：[目的]探討微小RNA(microRNA,miRNA/miR)1908對(duì)肺癌細(xì)胞A549的細(xì)胞周期及靶基因的調(diào)控作用。[方法]通過慢病毒轉(zhuǎn)染方法,上調(diào)A549細(xì)胞中miR-1908的表達(dá)水平,運(yùn)用噻唑藍(lán)法和流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)miR-1908對(duì)A549細(xì)胞增殖、周期和凋亡的影響。應(yīng)用DIANA-TOOLs及KEGG數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)miR-1908進(jìn)行生物信息學(xué)分析,探討其可能參與的信號(hào)通路和潛在靶基因。應(yīng)用RT-qPCR和Western blot技術(shù)檢測(cè)miR-1908對(duì)預(yù)測(cè)靶基因mRNA和蛋白表達(dá)水平的調(diào)控。[結(jié)果]與陰性對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染組上調(diào)miR-1908表達(dá)可引起A549細(xì)胞G2期阻滯,S期減少(P0.05),對(duì)細(xì)胞增殖和凋亡無明顯影響(P0.05)。miR-1908主要參與MAPK信號(hào)通路的調(diào)控,蛋白磷酸酶5(PP5)基因?yàn)槠渲匾臐撛诎谢�。與陰性對(duì)照組相比,轉(zhuǎn)染組上調(diào)miR-1908表達(dá)可引起PP5的蛋白表達(dá)增加(P0.05),但其mRNA表達(dá)無明顯改變(P0.05)。[結(jié)論]miR-1908可能通過對(duì)PP5基因正向調(diào)控或間接調(diào)控影響A549細(xì)胞周期,研究結(jié)果加深了對(duì)miRNAs在肺癌細(xì)胞中的作用及其機(jī)制的理解,并為miRNAs在肺癌中的進(jìn)一步研究提供線索。
[Abstract]:[objective] to investigate the regulation of cell cycle and target gene by microRNA-miRNA-miRnc-1908 in human lung cancer cell line A549. [methods] the expression of miR-1908 in A549 cells was up-regulated by lentivirus transfection. The effects of miR-1908 on the proliferation, cell cycle and apoptosis of A549 cells were detected by thiazolyl blue assay and flow cytometry. DIANA-TOOLs and KEGG databases were used to analyze the bioinformatics of A549 cells. RT-qPCR and Western blot techniques were used to detect the regulation of miR-1908 on the expression level of predicted target gene mRNA and protein. [results] compared with the negative control group, the expression of mRNA and protein was detected by using RT-qPCR and Western blot. Upregulation of miR-1908 expression in transfection group resulted in a decrease of P0.05 in G _ 2 arrest S phase of A549 cells, and no significant effect on cell proliferation and apoptosis. MiR-1908 mainly involved in the regulation of MAPK signaling pathway. Protein phosphatase 5 (PP5) gene is an important potential target gene. Upregulation of miR-1908 expression in transfection group could increase the expression of PP5 protein, but its mRNA expression did not change significantly. [conclusion] miR-1908 may affect the cell cycle of A549 cells through the positive or indirect regulation of PP5 gene. The results of this study have deepened the understanding of the role and mechanism of miRNAs in lung cancer cells and provided clues for the further study of miRNAs in lung cancer.
【作者單位】： 東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境醫(yī)學(xué)工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):81472939,81673132) 2016年度江蘇省普通高校學(xué)術(shù)學(xué)位研究生科研創(chuàng)新計(jì)劃(編號(hào):KYZZ16_0138) 江蘇省科技廳2015年社會(huì)發(fā)展項(xiàng)目(編號(hào):BE2015719) 南京市科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):201503006)
【分類號(hào)】：R734.2

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本文編號(hào)：1638590