本文選題：微小RNA-　切入點：A細胞　出處：《環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)》2017年11期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：[目的]探討微小RNA(microRNA,miRNA/miR)1908對肺癌細胞A549的細胞周期及靶基因的調(diào)控作用。[方法]通過慢病毒轉(zhuǎn)染方法,上調(diào)A549細胞中miR-1908的表達水平,運用噻唑藍法和流式細胞技術(shù)檢測miR-1908對A549細胞增殖、周期和凋亡的影響。應(yīng)用DIANA-TOOLs及KEGG數(shù)據(jù)庫對miR-1908進行生物信息學(xué)分析,探討其可能參與的信號通路和潛在靶基因。應(yīng)用RT-qPCR和Western blot技術(shù)檢測miR-1908對預(yù)測靶基因mRNA和蛋白表達水平的調(diào)控。[結(jié)果]與陰性對照組相比,轉(zhuǎn)染組上調(diào)miR-1908表達可引起A549細胞G2期阻滯,S期減少(P0.05),對細胞增殖和凋亡無明顯影響(P0.05)。miR-1908主要參與MAPK信號通路的調(diào)控,蛋白磷酸酶5(PP5)基因為其重要的潛在靶基因。與陰性對照組相比,轉(zhuǎn)染組上調(diào)miR-1908表達可引起PP5的蛋白表達增加(P0.05),但其mRNA表達無明顯改變(P0.05)。[結(jié)論]miR-1908可能通過對PP5基因正向調(diào)控或間接調(diào)控影響A549細胞周期,研究結(jié)果加深了對miRNAs在肺癌細胞中的作用及其機制的理解,并為miRNAs在肺癌中的進一步研究提供線索。
[Abstract]:[objective] to investigate the regulation of cell cycle and target gene by microRNA-miRNA-miRnc-1908 in human lung cancer cell line A549. [methods] the expression of miR-1908 in A549 cells was up-regulated by lentivirus transfection. The effects of miR-1908 on the proliferation, cell cycle and apoptosis of A549 cells were detected by thiazolyl blue assay and flow cytometry. DIANA-TOOLs and KEGG databases were used to analyze the bioinformatics of A549 cells. RT-qPCR and Western blot techniques were used to detect the regulation of miR-1908 on the expression level of predicted target gene mRNA and protein. [results] compared with the negative control group, the expression of mRNA and protein was detected by using RT-qPCR and Western blot. Upregulation of miR-1908 expression in transfection group resulted in a decrease of P0.05 in G _ 2 arrest S phase of A549 cells, and no significant effect on cell proliferation and apoptosis. MiR-1908 mainly involved in the regulation of MAPK signaling pathway. Protein phosphatase 5 (PP5) gene is an important potential target gene. Upregulation of miR-1908 expression in transfection group could increase the expression of PP5 protein, but its mRNA expression did not change significantly. [conclusion] miR-1908 may affect the cell cycle of A549 cells through the positive or indirect regulation of PP5 gene. The results of this study have deepened the understanding of the role and mechanism of miRNAs in lung cancer cells and provided clues for the further study of miRNAs in lung cancer.
【作者單位】： 東南大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境醫(yī)學(xué)工程教育部重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(編號:81472939,81673132) 2016年度江蘇省普通高校學(xué)術(shù)學(xué)位研究生科研創(chuàng)新計劃(編號:KYZZ16_0138) 江蘇省科技廳2015年社會發(fā)展項目(編號:BE2015719) 南京市科技計劃項目(編號:201503006)
【分類號】：R734.2

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本文編號：1638590