本文選題：神經(jīng)膠質(zhì)瘤　切入點：基因表達調(diào)控　出處：《腫瘤》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的 :研究大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,r HSG)過表達對膠質(zhì)瘤C6細胞侵襲的影響,并探討其可能的作用機制。方法 :用攜帶r HSG基因的重組腺病毒Adv-r HSG-GFP感染膠質(zhì)瘤C6細胞,同時設置Adv-GFP感染的陰性對照組以及僅PBS處理的空白對照組。采用實時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法檢測各組細胞中r HSG的表達變化。然后,采用細胞劃痕愈合實驗和Transwell遷移及侵襲實驗分別檢測r HSG過表達對膠質(zhì)瘤C6細胞遷移和侵襲的影響,細胞免疫熒光法和細胞黏附實驗分別分析r HSG過表達后C6細胞骨架形成和黏附能力的變化,實時熒光定量PCR和蛋白質(zhì)印跡法測定各組細胞中Rho/Rock信號通路關鍵分子Ras同源基因家族成員A(Ras homolog gene family,member A,RhoA)、Ras相關的C3肉毒底物1(Ras-related C3 botulinum toxin substrate 1,Rac1)、細胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)、Rho相關卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho associated coiled-coil forming protein kinase 1,Rock1)和Rock2的表達水平。結果 :重組腺病毒Adv-r HSG-GFP感染48和72 h后,膠質(zhì)瘤C6細胞中r HSG的表達水平明顯升高(P值均0.01)。與2個對照組相比,Advr HSG-GFP組細胞的劃痕愈合率明顯降低(P值均0.01),遷移、侵襲和黏附細胞數(shù)均明顯減少(P值均0.05)。r HSG過表達后C6細胞形態(tài)發(fā)生變化,絲狀偽足縮短,部分呈片狀;而且細胞中Rho A、Rac1、Cdc42、Rock1和Rock2的m RNA及蛋白表達水平均明顯降低(P值均0.05)。結論 :r HSG過表達可以抑制膠質(zhì)瘤C6細胞的侵襲,其作用機制可能與阻滯Rho/Rock信號通路有關。
[Abstract]:Aim: to study the effect of rat hyperplasia suppressor gene HSG overexpression on the invasion of glioma C6 cells and its possible mechanism. Methods: glioma C6 cells were infected with Adv-r HSG-GFP, a recombinant adenovirus carrying r HSG gene. At the same time, the negative control group of Adv-GFP infection and the blank control group treated only with PBS were set up. The expression of r HSG was detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting. The effects of r HSG overexpression on the migration and invasion of glioma C6 cells were detected by scratch healing assay and Transwell migration and invasion assay, respectively. The changes of cytoskeleton formation and adhesion ability of C6 cells after r HSG overexpression were analyzed by cell immunofluorescence assay and cell adhesion assay, respectively. Real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting assay for the detection of Ras homolog gene member of Ras homologous gene family member of Rho/Rock signaling pathway in each group of cells, including Ras C 3 botulinum toxin substrate 1 Rac1a, division cycle 42Cdc42C42rho, a member of the Ras homologous gene family member, member of the Ras homolog gene family member, Ras-related C 3 botulinum toxin substrate 1, Rho, and the cell cycle protein 42T cell, division cycle 42Cdc42a, a member of the Ras homologous gene family. Results: the expression levels of Rho associated coiled-coil forming protein kinase 1Rock1) and Rock2 were detected. Results: the recombinant adenovirus Adv-r HSG-GFP was infected 48 and 72 hours after infection. The expression level of r HSG in C6 glioma cells was significantly increased, P value was 0.01 and P value was 0.01, compared with two control groups, the rate of scar healing was significantly decreased and migration was also observed in the Avr HSG-GFP group, and the expression level of r HSG in C6 glioma cells was significantly higher than that in the control group. The number of invasiveness and adhesion cells decreased significantly (P < 0.05). After overexpression of HSG, the morphology of C6 cells was changed, the filamentous pseudopodia was shortened, and some of them were flaky. Moreover, the expression levels of m RNA and protein in Rho AroRac1CDc42C42Rock1 and Rock2 were significantly decreased by 0.050.Conclusion the overexpression of Rho HSG can inhibit the invasion of glioma C6 cells, and its mechanism may be related to blocking the Rho/Rock signaling pathway.
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學臨床醫(yī)學院;寧夏醫(yī)科大學寧夏顱腦疾病重點實驗室;寧夏醫(yī)科大學總醫(yī)院神經(jīng)外科;榆林市第一醫(yī)院神經(jīng)外科;濱州市人民醫(yī)院神經(jīng)外科;徐州市腫瘤醫(yī)院神經(jīng)外科;
【分類號】：R739.41

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