注射dsRNA對(duì)飛蝗Knickkopf基因在mRNA和蛋白水平的沉默效率
本文選題:飛蝗 切入點(diǎn):基因沉默 出處:《昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)》2016年12期 論文類(lèi)型:期刊論文
【摘要】:【目的】本研究旨在評(píng)估dsRNA對(duì)飛蝗Locusta migratoria Knickkopf(Knk)基因mRNA和蛋白表達(dá)的沉默效率,以期為基于RNAi技術(shù)探索飛蝗體內(nèi)基因功能的研究提供基礎(chǔ)資料。【方法】選擇飛蝗2齡第1天的若蟲(chóng),將體外合成的飛蝗Knk基因dsRNA注射進(jìn)入飛蝗體腔內(nèi),注射后48,72和96 h分別解剖試蟲(chóng)的腹部表皮,一半用于RT-q PCR方法檢測(cè)其mRNA表達(dá);另一半用于Western blot法檢測(cè)其蛋白的表達(dá)量。【結(jié)果】dsRNA注射進(jìn)入飛蝗體腔內(nèi)48,72和96 h后,與對(duì)照相比,Knk mRNA水平相對(duì)表達(dá)量分別降低78.3%,96.2%和95.1%;Knk蛋白表達(dá)量分別降低61.2%,33.3%和52.9%。【結(jié)論】注射ds Knk能顯著沉默飛蝗Knk基因mRNA水平和蛋白水平的表達(dá),但mRNA水平的沉默效率高于蛋白水平。
[Abstract]:[objective] to evaluate the silencing effect of dsRNA on the expression of mRNA and protein in Locusta migratoria KnickkopfKnkknkkknkkkknkknkknkkkknkkkkknkknkkkkknkkkknkknkkkknkknkkkknkkkknkkkkkkkknkkkkk@@. The Knk gene dsRNA was injected into the body cavity of locust migratoria migratoria in vitro. The abdominal epidermis of the tested insect was dissected at 4872 h and 96 h after injection, half of which was used to detect the expression of mRNA by RT-q PCR method. The other half was used to detect the protein expression by Western blot method. [results] dsRNA was injected into the body cavity of Locusta migratoria for 4872 h and 96 h. Compared with the control group, the relative expression of Knk mRNA decreased by 78.2% and 95.1%, respectively. The expression of Knk protein decreased by 61.2% and 52.9%, respectively. [conclusion] the expression of Knk gene mRNA and protein was significantly silenced by injection of DS Knk. But the silencing efficiency of mRNA level was higher than that of protein level.
【作者單位】: 山西大學(xué)應(yīng)用生物學(xué)研究所;山西大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272380,31672364) 山西省科技基礎(chǔ)條件平臺(tái)項(xiàng)目(2015091010)
【分類(lèi)號(hào)】:Q963
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,本文編號(hào):1580644
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