注射dsRNA對飛蝗Knickkopf基因在mRNA和蛋白水平的沉默效率
本文選題:飛蝗 切入點:基因沉默 出處:《昆蟲學報》2016年12期 論文類型:期刊論文
【摘要】:【目的】本研究旨在評估dsRNA對飛蝗Locusta migratoria Knickkopf(Knk)基因mRNA和蛋白表達的沉默效率,以期為基于RNAi技術(shù)探索飛蝗體內(nèi)基因功能的研究提供基礎資料!痉椒ā窟x擇飛蝗2齡第1天的若蟲,將體外合成的飛蝗Knk基因dsRNA注射進入飛蝗體腔內(nèi),注射后48,72和96 h分別解剖試蟲的腹部表皮,一半用于RT-q PCR方法檢測其mRNA表達;另一半用于Western blot法檢測其蛋白的表達量!窘Y(jié)果】dsRNA注射進入飛蝗體腔內(nèi)48,72和96 h后,與對照相比,Knk mRNA水平相對表達量分別降低78.3%,96.2%和95.1%;Knk蛋白表達量分別降低61.2%,33.3%和52.9%!窘Y(jié)論】注射ds Knk能顯著沉默飛蝗Knk基因mRNA水平和蛋白水平的表達,但mRNA水平的沉默效率高于蛋白水平。
[Abstract]:[objective] to evaluate the silencing effect of dsRNA on the expression of mRNA and protein in Locusta migratoria KnickkopfKnkknkkknkkkknkknkknkkkknkkkkknkknkkkkknkkkknkknkkkknkknkkkknkkkknkkkkkkkknkkkkk@@. The Knk gene dsRNA was injected into the body cavity of locust migratoria migratoria in vitro. The abdominal epidermis of the tested insect was dissected at 4872 h and 96 h after injection, half of which was used to detect the expression of mRNA by RT-q PCR method. The other half was used to detect the protein expression by Western blot method. [results] dsRNA was injected into the body cavity of Locusta migratoria for 4872 h and 96 h. Compared with the control group, the relative expression of Knk mRNA decreased by 78.2% and 95.1%, respectively. The expression of Knk protein decreased by 61.2% and 52.9%, respectively. [conclusion] the expression of Knk gene mRNA and protein was significantly silenced by injection of DS Knk. But the silencing efficiency of mRNA level was higher than that of protein level.
【作者單位】: 山西大學應用生物學研究所;山西大學生命科學學院;中國科學院動物研究所;
【基金】:國家自然科學基金項目(31272380,31672364) 山西省科技基礎條件平臺項目(2015091010)
【分類號】:Q963
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,本文編號:1580644
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