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犬細小病毒SH14株VP2基因原核表達及免疫原性分析

發(fā)布時間:2018-03-06 20:07

  本文選題:犬細小病毒 切入點:VP基因 出處:《中國動物傳染病學(xué)報》2016年01期  論文類型:期刊論文


【摘要】:根據(jù)犬細小病毒(Canine Parvovirus,CPV)SH14株基因序列設(shè)計引物,采用PCR方法擴增CPV VP2基因,經(jīng)Bam HⅠ、XhoⅠ雙酶切后,將其克隆至p GEX-4T-1載體,構(gòu)建重組表達載體p GEX-4T-VP2,經(jīng)酶切鑒定和測序驗證正確后轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21中進行誘導(dǎo)表達,應(yīng)用SDS-PAGE法檢測蛋白的表達。然后,使用純化的重組VP2蛋白制備其兔源多克隆抗體,分別應(yīng)用蛋白免疫印跡、間接免疫熒光檢測該抗體的免疫原性。結(jié)果表明,p GEX-4T-VP2能在大腸桿菌中以包涵體形式高效表達,所制備的兔抗CPV-VP2抗體能與重組蛋白和病毒蛋白發(fā)生特異性反應(yīng)。本研究為研發(fā)CPV亞單位疫苗、檢測技術(shù)及致病機理研究等奠定了物質(zhì)基礎(chǔ)。
[Abstract]:According to the gene sequence of Canine Parvovirus-CPV SH14 strain, the CPV VP2 gene was amplified by PCR method. The gene was digested by Bam H 鈪,

本文編號:1576287

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