發(fā)布時(shí)間：2018-03-05 16:40

  本文選題：大豆　切入點(diǎn)：Kti基因　出處：《中國油料作物學(xué)報(bào)》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制劑(trypsin inhibitor,Kti)是大豆品質(zhì)的主要營養(yǎng)抑制因子之一,培育低Kti含量的大豆品種是提升大豆品質(zhì)的關(guān)鍵。本研究采用RT-PCR技術(shù)克隆得到大豆Kti基因的核心保守序列,并構(gòu)建成種子特異性表達(dá)的、具有Kti基因反向重復(fù)結(jié)構(gòu)的RNAi載體,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法侵染大豆品種吉林30子葉節(jié),通過潮霉素篩選和PCR檢測,獲得4株轉(zhuǎn)基因陽性植株。RT-PCR檢測表明,構(gòu)建的種子特異性RNAi載體可以在轉(zhuǎn)基因植株的種子中特異表達(dá),且Kti基因表達(dá)量均有降低;通過胰蛋白酶抑制劑活性檢測發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)基因大豆籽粒中胰蛋白酶抑制劑活性平均降低了77.5%。為進(jìn)一步評價(jià)RNAi技術(shù)對大豆Kti基因的表達(dá)調(diào)控效果奠定良好基礎(chǔ)。
[Abstract]:Soybean Kunitz trypsin inhibitor (trypsin inhibitor Kti) is the main nutritional quality of soybean inhibitor of soybean varieties cultivation of low Kti content is the key to enhance the quality of soybean. This research adopts RT-PCR technology cloned core conserved sequence of soybean Kti gene, and constructed the seed specific expression vector of RNAi, with the reverse repeat Kti gene structure, using Agrobacterium tumefaciens infecting soybean cultivar Jilin 30 cotyledon node, through hygromycin selection and PCR detection, we obtained 4 transgenic positive plants showed that.RT-PCR, a construction of specific RNAi vector can be specifically expressed in transgenic plant seeds, and the Kti gene expression was significantly reduced; by detecting the activity of trypsin inhibitor found that transgenic soybean seeds trypsin inhibitor activity reduces the average 77.5%. for further evaluation of RNAi technology on Soybean The effect of Kti gene expression regulation lay a good foundation.

【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;吉林市農(nóng)業(yè)科學(xué)院;
【基金】：吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20130522082JH,20140101148JC) 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)校內(nèi)啟動基金(2015007) 吉林市科技局項(xiàng)目(20162003)
【分類號】：S565.1

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本文編號：1571067