玉米赤霉烯酮降解酶基因mbZHD的原核表達(dá)及其降解毒素初步研究
本文選題:玉米赤霉烯酮 切入點(diǎn):ZEN降解酶基因 出處:《中國(guó)糧油學(xué)報(bào)》2017年08期 論文類型:期刊論文
【摘要】:玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)是由鐮刀菌屬產(chǎn)生的次生代謝物,是極易污染糧食作物的真菌毒素之一。ZEN具有強(qiáng)烈的雌激素樣效應(yīng)及致癌性,給人類和動(dòng)物的健康造成巨大威脅。本研究在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行同源比對(duì),獲得了一些ZHD101降解酶的同源基因,其中,1個(gè)來(lái)源于真菌——楊盤二孢菌(Marssonina brunnea)的蛋白序列與ZHD101具有32%的同源性,基因大小為861 bp。通過(guò)化學(xué)合成方法得到該全長(zhǎng)基因,通過(guò)構(gòu)建E.coli原核表達(dá)系統(tǒng)進(jìn)行蛋白表達(dá),蛋白經(jīng)親和色譜純化后對(duì)ZEN分子進(jìn)行降解活性驗(yàn)證,HPLC結(jié)果表明,該蛋白在6 h內(nèi)對(duì)10μg ZEN分子的降解率為98%,酶活為200 U/m L,從而獲得了1個(gè)新的ZEN降解酶基因。
[Abstract]:Zen is a secondary metabolite produced by Fusarium. Zen is one of the mycotoxins that can easily pollute grain crops. Zen has strong estrogenic effect and carcinogenicity. This study carried out homology comparison in NCBI database and obtained some homologous genes of ZHD101 degrading enzyme. Among them, one protein sequence from the fungus Marssonina brunnea has 32% homology with ZHD101, and the gene size is 861bp. the full-length gene was obtained by chemical synthesis, and the protein was expressed by constructing E. coli prokaryotic expression system. After purification by affinity chromatography, the degradation activity of ZEN molecule was verified by HPLC. The results showed that the degradation rate of 10 渭 g ZEN molecule was 98% and the enzyme activity was 200 U / mL within 6 h. A new ZEN degrading enzyme gene was obtained.
【作者單位】: 國(guó)家糧食局科學(xué)研究院;
【基金】:國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2015BAK43B01) 公益性行業(yè)(糧食)科研專項(xiàng)(201513006)
【分類號(hào)】:Q936
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,本文編號(hào):1565273
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