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茶樹金屬耐受蛋白基因CsMTP11的克隆及功能分析

發(fā)布時間:2018-02-21 21:51

  本文關鍵詞: 茶樹 重金屬耐受蛋白 基因克隆 錳 出處:《作物學報》2017年05期  論文類型:期刊論文


【摘要】:金屬耐受蛋白MTP(metal tolerance protein)是陽離子轉運蛋白(CDF)家族的重要成員,在植物重金屬轉運過程中發(fā)揮重要調控作用。本研究以中茶108茶樹為試驗材料,通過RT-PCR和RACE方法克隆到茶樹重金屬耐受蛋白基因CsMTP11(Gen Bank登錄號為KX450265),其全長c DNA為1197 bp,編碼398個氨基酸殘基,其編碼蛋白分子量為44.85 k D,等電點為5.34。在線軟件分析表明,CsMTP11蛋白具有5個跨膜結構域,且含有CDF家族的其他保守結構域。系統(tǒng)進化樹分析結果表明,茶樹CsMTP11與葡萄VvMTP11進化同源性最近,其氨基酸序列相似度高達90%;虮磉_模式分析表明,CsMTP11基因在茶樹老葉中的表達量最高,根中的表達量最低,另外,CsMTP11基因受重金屬Mn和Co離子脅迫誘導表達。CsMTP11-YFP融合蛋白在擬南芥原生質體共定位試驗表明,CsMTP11-YFP融合蛋白定位于質膜。CsMTP11在釀酒酵母及其突變株中的異源表達可以提高其對重金屬Mn和Co離子的耐受性。綜上所述,茶樹CsMTP11屬于Mn-CDF亞家族,可能參與茶樹對重金屬錳和鈷的轉運過程。
[Abstract]:Metal tolerance protein (MTP(metal tolerance) is an important member of cationic transporter protein family, which plays an important role in heavy metal transport in plants. In this study, Zhongcha 108 tea plant was used as experimental material. By means of RT-PCR and RACE, the CsMTP11(Gen Bank gene of tea tree heavy metal tolerance protein was cloned into KX450265, and its full-length c DNA was 1197 BP, encoding 398 amino acid residues. The molecular weight of the encoded protein is 44.85 KD and the isoelectric point is 5.34. The on-line software analysis shows that the CsMTP11 protein has five transmembrane domains and other conserved domains of the CDF family. Phylogenetic tree analysis shows that CsMTP11 protein has five transmembrane domains. The similarity of amino acid sequence of tea plant CsMTP11 and grape VvMTP11 is as high as 90%. The expression pattern of CsMTP11 gene is the highest in the old leaves of tea plant and the lowest in the root. In addition, the co-localization of CsMTP11-YFP fusion protein induced by heavy metal mn and Co ions stress in Arabidopsis thaliana protoplasts showed that CsMTP11-YFP fusion protein was located in plasma membrane. CsMTP11 could be expressed in Saccharomyces cerevisiae and its mutant. High tolerance to heavy metal mn and Co ions. Tea CsMTP11 belongs to the Mn-CDF subfamily and may be involved in the transport of heavy metals mn and Co in tea plants.
【作者單位】: 西南大學食品科學學院;
【基金】:國家自然科學基金項目(31400583) 重慶市基礎與前沿研究計劃一般項目(cstc2014jcyjA80011) 中央高;緲I(yè)務費專項(XDJK2014C070)資助~~
【分類號】:S571.1

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本文編號:1522949


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