蘿卜水通道蛋白基因RsAQP1b的表達(dá)模式及功能分析
本文關(guān)鍵詞: 蘿卜 水通道蛋白 表達(dá)模式 過表達(dá) 出處:《中國蔬菜》2017年05期 論文類型:期刊論文
【摘要】:以蘿卜品種白玉春為材料,利用同源克隆的方法獲得蘿卜水通道蛋白基因Rs AQP1b的編碼序列全長,在蘿卜苗期干旱脅迫下分析Rs AQP1b基因及蛋白的表達(dá)模式;在煙草中表達(dá)該基因,研究干旱脅迫下煙草中MDA含量及保護(hù)酶的活性變化。結(jié)果表明:蘿卜水通道蛋白基因Rs AQP1b的編碼序列全長861bp,編碼286個氨基酸。制備了Rs AQP1b多克隆抗體,效價在1∶512000以上。RealtimePCR與Westernblot檢測表明,干旱脅迫導(dǎo)致Rs AQP1b基因與蛋白的表達(dá)水平整體下降。PEG6000干旱處理下的轉(zhuǎn)基因與野生型煙草MDA含量都增加,但是轉(zhuǎn)基因煙草的增加幅度小;隨著干旱程度加重,轉(zhuǎn)Rs AQP1b基因煙草中SOD含量呈上升趨勢,CAT含量呈先上升后下降趨勢,POD含量呈上升趨勢,酶活性均高于相應(yīng)野生型對照。
[Abstract]:The full length of RS AQP1b coding sequence of radish aquaporin gene was obtained by homologous cloning from the radish variety Bai Yuchun. The expression pattern of RS AQP1b gene and protein was analyzed under drought stress at seedling stage of radish, and the gene was expressed in tobacco. The changes of MDA content and protective enzyme activity in tobacco under drought stress were studied. The results showed that the encoding sequence of radish aquaporin gene RS AQP1b was 861 BP, encoding 286 amino acids. The polyclonal antibody to RS AQP1b was prepared. Realtime PCR and Westernblot analysis showed that the expression level of Rs AQP1b gene and protein decreased under drought stress. The MDA content of transgenic and wild-type tobacco increased under drought treatment, but the increase of transgenic tobacco was small. With the increase of drought degree, the content of SOD in transgenic AQP1b transgenic tobacco showed an increasing trend, and the content of cat increased first and then decreased, and the activity of enzyme was higher than that of the corresponding wild-type control.
【作者單位】: 廊坊師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:河北省教育廳青年基金項目(QN2017351) 廊坊師范學(xué)院校級項目(LSLQ201407) 廊坊師范學(xué)院教改項目(K2015-13)
【分類號】:S631.1
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,本文編號:1520157
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