藤茶香樹脂醇合成酶基因編碼區(qū)克隆及表達分析
本文關鍵詞: 中草藥 藤茶 香樹脂醇合成酶 亞細胞定位 Southern印跡 熒光定量 出處:《西北植物學報》2017年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:為研究藤茶(Ampelopsis grossedentata)三萜類化合物的生物合成,采用RT-PCR方法,從藤茶葉片cDNA中擴增得到香樹脂醇合成酶(amyrin synthase)基因,命名為AgAS。該基因編碼區(qū)長2 250bp,編碼750個氨基酸,與葡萄的同源蛋白親緣關系最近。亞細胞定位和Southern blot結(jié)果表明,AgAS編碼蛋白主要定位于細胞核與細胞膜,在藤茶基因組中存在2個拷貝。實時熒光定量PCR結(jié)果顯示,AgAS基因在紫芽藤茶的根、莖和葉均有表達,其中葉片中表達最高,莖次之,根中表達量最少,且隨著葉片成熟程度的增加,表達量呈先升后降趨勢;而在綠芽藤茶中,AgAS基因在葉片中的表達量隨著成熟程度的增加呈上升趨勢,根與莖中表達量相對較少。
[Abstract]:In order to study the biosynthesis of triterpenoids from Ampelopsis grossedentata, the amyrin synthase gene was amplified from the cDNA of tea leaves by RT-PCR method. The gene was named AgAS. the coding region of the gene was 2250bpand encoding 750 amino acids. The results of subcellular localization and Southern blot showed that the protein encoded by Agnas was mainly located in the nucleus and cell membrane. The results of real-time fluorescence quantitative PCR showed that Agnas gene was expressed in the roots, stems and leaves of Violet tea, in which the highest expression was found in leaves, the second in stems, and the least in roots. With the increase of leaf maturation, the expression level of AgAS increased first and then decreased, while the expression of AgAS in leaves increased with the increase of maturity, and the expression of AgAS in root and stem was relatively small.
【作者單位】: 福建農(nóng)林大學生命科學學院;福建農(nóng)林大學作物科學學院;
【基金】:國家科技支撐計劃(2013BAD01B05)
【分類號】:Q943.2;S567.19
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