嗜熱細菌Clostridium thermocellum阿魏酸酯酶基因的克
本文關(guān)鍵詞: Clostridium thermocellum 嗜熱阿魏酸酯酶 碳水化合物結(jié)合域 異源表達 酶學特性 出處:《微生物學通報》2017年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:【目的】闡明嗜熱細菌Clostridium thermocellum Xyn Z蛋白的阿魏酸酯酶催化域的酶學特性,為其在生物質(zhì)能源及其它發(fā)酵工業(yè)中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。【方法】分別構(gòu)建了C.thermocellum Xyn Z的阿魏酸酯酶催化域(FAE)及該阿魏酸酯酶催化域和碳水化合物結(jié)合域(FAE-CBM6)編碼基因的原核表達載體,并在大腸桿菌菌株BL21(DE3)中異源表達,在此基礎(chǔ)上分析比較了溫度、pH、底物、金屬離子及CBM6結(jié)合域?qū)Π⑽核狨ッ富钚缘挠绊。【結(jié)果】重組FAE酶及FAE-CBM6酶發(fā)揮催化活性的適宜pH值為5.0-9.0,適宜溫度為50-70°C,它們對不同金屬離子的響應(yīng)有差異!窘Y(jié)論】在同一反應(yīng)條件下,FAE-CBM6酶的酶活均比FAE高,說明CBM6結(jié)合域的存在對于阿魏酸酯酶活性有促進作用。
[Abstract]:[objective] to elucidate the enzymatic properties of ferulic esterase domain of Clostridium thermocellum Xyn Z protein. [methods] the prokaryotic expression vectors of ferulic acid esterase catalytic domain (FAE) of C. thermocellum Xyn Z and its carbohydrate binding domain (FAE-CBM6) and ferulic esterase catalytic domain (FAE) were constructed, respectively. On the basis of the heterologous expression of Escherichia coli strain BL21 (DE3), the pH of temperature and substrate were analyzed and compared. The effect of metal ions and CBM6 binding domain on ferulic acid esterase activity. [results] the optimum pH value of recombination FAE enzyme and FAE-CBM6 enzyme was 5.0-9.0, and the suitable temperature was 50-70 擄C. [conclusion] their responses to different metal ions were different. The enzyme activity of FAE-CBM6 was higher than that of FAE under the same reaction condition. It indicated that the existence of CBM6 binding domain could promote ferulic esterase activity.
【作者單位】: 江蘇大學環(huán)境與安全工程學院生物質(zhì)能源研究所國家能源非糧生物質(zhì)原料研發(fā)中心華東分中心;
【基金】:國家自然科學基金項目(No.31671754) 江蘇大學高級人才啟動基金項目(No.15JDG012)~~
【分類號】:Q78;Q936
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,本文編號:1496479
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