本文關(guān)鍵詞： 二斑葉螨 多重抗性 解毒酶基因 RT-q PCR　出處：《中國農(nóng)業(yè)科學》2016年09期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：【目的】二斑葉螨(Tetranychus urticae)是一種重要的農(nóng)業(yè)害螨,由于個體小、繁殖快等特點,極易產(chǎn)生抗藥性,論文從生理生化和分子水平探討二斑葉螨m RNA水平相對表達量的變化,旨在明確二斑葉螨對混劑的多重抗性機制,為該螨的綜合治理提供依據(jù)�！痉椒ā吭跍囟�(25±l)℃,相對濕度60%±5%,光周期L㑳D=16 h㑳8 h的室內(nèi)條件下,于盆栽豇豆苗上飼養(yǎng)不接觸任何藥劑的二斑葉螨敏感品系(SS)和用螺螨酯、甲氰菊酯、阿維菌素以其單劑的致死中濃度(LC50)為汰選濃度混合連續(xù)汰選的多重抗性品系(Mp-R);Mp-R品系用藥4—5次待其種群擴增后,參照FAO推薦的葉片殘毒法進行室內(nèi)毒力測定一次,計算其LC50,求出抗性倍數(shù)(RR),并記為一個汰選周期;連續(xù)汰選3個周期后,逐漸增加汰選濃度,用Polo Plus軟件求其毒力回歸方程、LC50、抗性指數(shù)及卡方值;采用生化分析法測定選育50代的二斑葉螨SS與Mp-R品系卵、幼螨、若螨、雄成螨、雌成螨的谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(GSTs)、羧酸酯酶(Car Es)、多功能氧化酶(MFOs)的活性,以ELFn為內(nèi)參基因,采用RT-q PCR技術(shù)以比較Ct值的方法計算二斑葉螨Mp-R品系中10個與抗性相關(guān)的解毒酶基因的表達量�！窘Y(jié)果】在室內(nèi)經(jīng)50代抗性選育,二斑葉螨對阿維菌素、甲氰菊酯及螺螨酯的LC50分別達到1 103.55、5 993.33和2 345.62 mg?L-1,抗性倍數(shù)分別為603.03、167.65和51.77倍。卵中Mp-R品系MFOs比活力顯著高于SS品系,GSTs、Car Es比活力差異不顯著;其他發(fā)育階段Mp-R品系的GSTs、Car Es比活力顯著高于SS品系,MFOs比活力則差異不顯著;Mp-R品系雌成螨的GSTs、Car Es比活力顯著高于其他發(fā)育階段,卵的MFOs比活力顯著高于其他發(fā)育階段。與敏感品系相比,二斑葉螨Tu GSTd05、Tu GSTd06與Tu GSTd09基因表達量在Mp-R品系各發(fā)育階段顯著上調(diào)1.80倍以上,Tu GSTd01表達量在若螨期顯著上調(diào)1.63倍,其他發(fā)育階段差異不顯著;CYP392E10表達量在卵中極顯著上調(diào)5.87倍,幼螨、若螨階段顯著上調(diào)2.15倍和2.09倍,成螨階段表達量差異不顯著;CYP392A6在卵、幼螨與若螨階段表達量均顯著上調(diào)1.89、1.64和1.59倍,在成螨階段表達量差異不顯著。CYP392A16在各發(fā)育階段均極顯著上調(diào),卵中上調(diào)6.97倍,幼螨中上調(diào)8.20倍,若螨中上調(diào)8.88倍,雄成螨上調(diào)7.34倍,雌成螨上調(diào)8.59倍。CYP392D 8在卵、幼螨和雄、雌成螨中表達量均顯著上調(diào)2.18、2.00、2.03和2.41倍,在若螨階段表達量差異不顯著;Tu CCE35在若螨及雄、雌成螨中表達量顯著上調(diào)1.58、1.86和2.65倍;Tu CCE36在卵和雄、雌成螨中表達量顯著上調(diào)1.73、1.89和2.14倍�！窘Y(jié)論】與敏感品系相比,二斑葉螨Mp-R品系10個與抗性相關(guān)的解毒酶基因表達量在其不同發(fā)育階段均有不同程度的變化。CYP392A16表達量在各發(fā)育階段上調(diào)較大,可能參與了二斑葉螨多重抗性的形成;其余基因表達量均未見大幅度上調(diào),這些基因是否參與了對3種藥劑的代謝還需進一步驗證。
[Abstract]:銆愮洰鐨勩，

本文編號：1496259