本文關(guān)鍵詞： 癌胚抗原 迷你基因 基因疫苗 腫瘤生物治療　出處：《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2017年03期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:利用含有CEA_(625-667)基因的單倍體疫苗pc DNA-CEA_(625-667)及三串聯(lián)體的DNA疫苗pc DNA-tri CEA_(625-667)免疫小鼠后,觀察其誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫效應(yīng)。方法:采用4~6周純系BALB/c小鼠,肌肉注射法分pc-DNA3.0、pc DNACEA_(625-667)、pc DNA-tri CEA_(625-667)三組免疫小鼠,對(duì)其激發(fā)的機(jī)體特異性及非特異性免疫反應(yīng)進(jìn)行研究。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)免疫小鼠脾細(xì)胞的T細(xì)胞亞群和CD4~+/CD8~+比值;3H-TdR摻入法檢測(cè)免疫小鼠的特異性淋巴細(xì)胞增殖;Western blot雜交及ELISA法檢測(cè)免疫小鼠血清中的CEA特異性抗體;ELISA法檢測(cè)免疫動(dòng)物脾細(xì)胞體外誘導(dǎo)IFN-γ、IL-4、GM-CSF的分泌水平。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的CD4~+/CD8~+比值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;經(jīng)過(guò)基因疫苗免疫的小鼠與天然小鼠相比,其脾細(xì)胞在體外與短肽共孵育之后,會(huì)在更短的時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)更明顯的細(xì)胞增殖;免疫了CEA迷你基因串聯(lián)體腫瘤疫苗的小鼠血清中可以產(chǎn)生低滴度的抗體,提示HTL的活化;免疫小鼠脾細(xì)胞上清中IFN-γ的含量明顯高于對(duì)照組,而pc-DNA3.0,pc DNA-CEA_(625-667),pc DNA-triCEA_(625-667)各組IL-4的含量均很低,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;迷你基因三倍體疫苗所引發(fā)的增殖效應(yīng)以及釋放細(xì)胞因子的水平均高于迷你基因一倍體,說(shuō)明我們所采用將目的基因多倍串聯(lián)的抗原改造的方式起到了增強(qiáng)免疫效應(yīng)的作用。結(jié)論:CEA迷你肽表位基因單倍體及三倍體疫苗均不能顯著改變動(dòng)物體內(nèi)CD4/CD8比值,但均能誘導(dǎo)HTL活化,使被免疫機(jī)體T細(xì)胞趨向于Th1效應(yīng)且三倍體疫苗的免疫原性強(qiáng)于單倍體疫苗。
[Abstract]:Objective: to make use of the haploid vaccine PC DNA-CEA virus containing the gene CEAX 625-667). Mice were immunized with DNA vaccine PC DNA-tri CEA (625-667). Methods: BALB/c mice were divided into two groups by intramuscular injection of pc-DNA 3.0 and pcDNACEA (625-667). The mice were immunized with PC DNA-tri. The specific and nonspecific immune responses stimulated by the immunized mice were studied. The T cell subsets and CD4 / / CD8 ~ ratio of spleen cells were detected by flow cytometry. The specific lymphocyte proliferation of immunized mice was detected by 3H-TdR incorporation. Western blot hybridization and ELISA assay were used to detect the CEA specific antibody in the serum of immunized mice. ELISA assay was used to detect IFN- 緯 IL-4 induced by splenocytes of immunized animals in vitro. Results: there was no significant difference in the ratio of CD4 to / / CD8 ~ between the experimental group and the control group. Compared with the natural mice, the spleen cells of the mice immunized with the gene vaccine could proliferate more obviously in a shorter time after the spleen cells were incubated with the short peptide in vitro. Mice immunized with CEA mini gene tandem tumor vaccine could produce low titer antibody, indicating the activation of HTL. The content of IFN- 緯 in the supernatant of spleen cells of immunized mice was significantly higher than that of the control group, while pc-DNA 3.0 pc-DNA-CEA was found in the spleen cell supernatant of immunized mice. The content of IL-4 in each group was very low, and the difference was not statistically significant. The proliferative effect and the release level of cytokines induced by the triploid vaccine were higher than those of the triploid gene. The results showed that the antigenic modification of the multiplex series of the target gene played an important role in enhancing the immune response. Conclusion:. Neither haploid nor triploid vaccine of CEA mini peptide epitope gene could significantly change the CD4/CD8 ratio in animals. All of them could induce the activation of HTL, and the immunogenicity of triploid vaccine was stronger than that of haploid vaccine.
【作者單位】： 吉林省人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)診治實(shí)驗(yàn)中心;吉林大學(xué)第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科;
【基金】：吉林省科技廳國(guó)際合作項(xiàng)目(20140414043GH);吉林省科技廳中青年科技創(chuàng)新領(lǐng)軍人才及團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(20140519018JH);吉林省科技廳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(20122113)資助 吉林省人社廳省人才開(kāi)發(fā)資金(2016年度)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 1本文受吉林省科技廳國(guó)際合作項(xiàng)目(20140414043GH)、吉林省科技廳中青年科技創(chuàng)新領(lǐng)軍人才及團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(20140519018JH)、吉林省人社廳省人才開(kāi)發(fā)資金(2016年度)和吉林省科技廳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(20122113)資助。2吉林大學(xué)第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科,長(zhǎng)春130021。癌胚抗原(Carcinoembryonic a

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