蘋果果實(shí)β-半乳糖苷酶基因啟動(dòng)子的克隆與功能分析
本文關(guān)鍵詞: 蘋果 β-半乳糖苷酶 啟動(dòng)子 果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育 出處:《西北植物學(xué)報(bào)》2017年01期 論文類型:期刊論文
【摘要】:根據(jù)已發(fā)表的蘋果基因組序列設(shè)計(jì)特異引物,克隆得到蘋果品種‘嘎拉’中β-半乳糖苷酶基因(Md-gal)的啟動(dòng)子。序列分析表明,該啟動(dòng)子除含有大多數(shù)高等植物啟動(dòng)子具有的保守元件外,還含有大量光響應(yīng)元件和與激素相關(guān)的順式作用元件,主要有赤霉素響應(yīng)元件(GARE-motif和P-box)、茉莉酸甲酯(MeJA)應(yīng)答元件(CGTCA-motif和TGACG-motif)和生長(zhǎng)素響應(yīng)元件(TGA-element);構(gòu)建5個(gè)不同長(zhǎng)度Md-gal啟動(dòng)子和GUS基因融合的瞬時(shí)表達(dá)載體,并進(jìn)行蘋果果實(shí)和煙草葉片轉(zhuǎn)化試驗(yàn),結(jié)果顯示,5個(gè)啟動(dòng)子均具有啟動(dòng)子活性,在Md-gal啟動(dòng)子序列中激活與抑制調(diào)節(jié)元件并存,正調(diào)控元件位于-1206~-754bp區(qū)域,負(fù)調(diào)控元件位于-754~-597bp區(qū)域;對(duì)Md-gal啟動(dòng)子進(jìn)行激素響應(yīng)分析結(jié)果顯示,激素處理可對(duì)其產(chǎn)生誘導(dǎo)作用,且MeJA處理后GUS活性最高。研究表明,Md-gal啟動(dòng)子具有真核基因啟動(dòng)子的基本結(jié)構(gòu)特征和正負(fù)調(diào)控特性,可響應(yīng)外源激素處理,可能在蘋果果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育和成熟軟化方面具有一定的作用。
[Abstract]:The promoter of 尾 -galactosidase gene (Md-gal) in apple variety 'Gala' was cloned by designing specific primers according to the published genomic sequence of apple. The sequence analysis showed that the promoter of 尾 -galactosidase gene was obtained. In addition to the conservative elements of most higher plant promoters, the promoter also contains a large number of photoresponse elements and cis-acting elements associated with hormones. There are mainly gibberellin response elements GARE-motif and P-box). The response elements (CGTCA-motif and TGACG-motif) and auxin response elements (TGA-elemental) of methyl jasmonate (Meja); Five transient expression vectors with different length of Md-gal promoter and GUS gene fusion were constructed and transformed into apple fruit and tobacco leaves. The results showed that all five promoters had promoter activity. In the Md-gal promoter sequence, the active and inhibitory regulatory elements coexist. The positive regulator is located in the region of -1206 ~ (-754) BP, and the negative regulatory element is located in the region of -754 ~ (-597) BP. The results of hormone response analysis of Md-gal promoter showed that hormone treatment could induce it, and the activity of GUS was the highest after MeJA treatment. Md-gal promoter has the basic structure characteristics and positive and negative regulatory characteristics of eukaryotic gene promoter, which can respond to exogenous hormone treatment, and may play a role in apple fruit growth, development and ripening and softening.
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)園藝學(xué)院;陜西省蘋果工程技術(shù)研究中心;
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-28) “十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國(guó)家科技計(jì)劃(2013BAD02B01-2) 西北農(nóng)林科技大學(xué)專項(xiàng)資金(2013BSJJ113,2014YB086)
【分類號(hào)】:S661.1;Q943.2
【正文快照】: 果肉質(zhì)地是決定蘋果果實(shí)內(nèi)在品質(zhì)的重要指標(biāo),也是影響果實(shí)商品性和消費(fèi)者偏好的重要因素。植物細(xì)胞壁使果實(shí)具有一定的形狀和彈性,其結(jié)構(gòu)和成分的改變是引起果實(shí)質(zhì)地變化的主要原因[1-2]。研究表明,在果實(shí)成熟過(guò)程中,細(xì)胞膨壓發(fā)生改變,細(xì)胞壁酶作用于初生壁和胞間層,使得細(xì)胞
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,本文編號(hào):1480012
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