本文關(guān)鍵詞： 檸條錦雞兒 LEA 基因克隆 表達(dá)分析　出處：《華北農(nóng)學(xué)報》2017年02期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：為研究胚胎發(fā)育晚期蛋白(LEA)在檸條中的生物學(xué)功能,從已構(gòu)建的檸條錦雞兒干旱脅迫抑制削減雜交文庫中篩選到一條LEA蛋白編碼基因,并采用RT-PCR法進(jìn)行克隆。所得LEA基因的開放閱讀框(ORF)長1 119 bp,編碼373個氨基酸的蛋白質(zhì),命名為CkLEA4-1。結(jié)合序列比對與系統(tǒng)進(jìn)化分析結(jié)果,推斷CkLEA4-1屬于5族LEA蛋白。利用實時熒光定量PCR技術(shù)對CkLEA4-1在干旱、高鹽等逆境脅迫條件下的表達(dá)情況進(jìn)行初步研究,結(jié)果表明,CkLEA4-1受到不同程度的誘導(dǎo),推測該基因可能與檸條錦雞兒響應(yīng)逆境脅迫有關(guān)。研究還成功構(gòu)建了CkLEA4-1的過表達(dá)載體p Can G-CkLEA4-1,得到轉(zhuǎn)基因純合體株系,為進(jìn)一步研究檸條錦雞兒CkLEA4-1基因的功能提供了材料。
[Abstract]:In order to study the biological function of Lea (late embryonic development protein) in Caragana korshinskii, a LEA protein encoding gene was screened from the constructed cDNA library of Caragana korshinskii (Caragana korshinskii). The open reading frame of LEA gene was 1 119 BP long and encoded 373 amino acids. It was named CkLEA4-1. combined with sequence alignment and phylogenetic analysis. It was inferred that CkLEA4-1 belonged to five families of LEA protein. The expression of CkLEA4-1 under stress conditions such as drought and high salt was studied by real-time fluorescence quantitative PCR. The results showed that CkLEA4-1 was induced to different degrees. It was suggested that the gene might be related to the response of Caragana korshinskii to stress stress. The overexpression vector p Can G-CkLEA4-1 of CkLEA4-1 was constructed successfully. Transgenic homozygous lines were obtained, which provided materials for further study on the function of Caragana korshinskii CkLEA4-1 gene.
【作者單位】： 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31560199;31360169) 內(nèi)蒙古自治區(qū)科技創(chuàng)新團(tuán)隊(201503004) 內(nèi)蒙古自治區(qū)草原英才團(tuán)隊
【分類號】：S793.3
【正文快照】： 在植物整個生命周期中,干旱、鹽堿和凍害成為限制植物生長發(fā)育的重要逆境因子,在長期的進(jìn)化過程中植物為抵御這些環(huán)境脅迫,形成了特定、復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制[1-2]。其中胚胎發(fā)育晚期蛋白(Late embryogenesis abundant,LEA)就是植物在遭遇逆境時誘導(dǎo)合成的一系列功能蛋白,具有保護(hù)植

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