MicroRNA及其靶基因在糖尿病腎病小鼠腎臟的表達(dá)
本文關(guān)鍵詞: 糖尿病腎病 microRNA 實時熒光定量PCR 靶基因 出處:《科技導(dǎo)報》2017年04期 論文類型:期刊論文
【摘要】:驗證與糖尿病腎病小鼠腎臟相關(guān)的microRNAs的表達(dá)并運(yùn)用實時熒光定量PCR分析靶基因與糖尿病腎病的關(guān)系。以db/db小鼠為模型組(DN組),db/m小鼠為正常組(NC組),定期測量小鼠的體重、血糖、甘油三酯、總膽固醇及24 h尿蛋白排泄率。留取DN小鼠與NC小鼠腎臟組織,檢測腎臟組織形態(tài)學(xué)染色及實時熒光定量PCR(qRT-PCR)。qRT-PCR驗證差異表達(dá)的microRNAs及其靶基因的m RNA表達(dá)水平。血糖、24 h尿蛋白排泄率結(jié)果表明糖尿病腎病動物模型構(gòu)建成功。與NC小鼠相比,DN小鼠腎臟miR-196a、miR-21、miR-200b表達(dá)明顯升高,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。miR-196a、miR-200b、miR-21的表達(dá)水平與血糖、甘油三酯、總膽固醇、24 h尿蛋白排泄率存在正相關(guān)關(guān)系(P0.05)。利用miRNAs數(shù)據(jù)庫預(yù)測miR-196a的靶基因有ANX1、HOXB7、PTEN、FOXO1、HOXB8、HOXA5等。與NC組比較,DN組ANX1、FOXO1的m RNA表達(dá)水平降低,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。同時ANX1、FOXO1與24 h尿蛋白排泄率存在正相關(guān)(P0.05)。MiR-196a可能通過調(diào)節(jié)ANX1、FOXO1的表達(dá)水平來參與糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:To verify the expression of microRNAs related to kidney in diabetic nephropathy mice and to analyze the relationship between target gene and diabetic nephropathy by real-time fluorescence quantitative PCR. DN group. The body weight, blood glucose, triglyceride, total cholesterol and 24 h urinary protein excretion rate of db/m mice were measured regularly. Kidney tissues of DN mice and NC mice were collected. Detection of renal histomorphology and real-time fluorescence quantitative PCRQRT-PCR). The expression level of m RNA of differentially expressed microRNAs and its target gene was confirmed by qRT-PCR. The results of 24 h urinary protein excretion rate showed that the animal model of diabetic nephropathy was successfully constructed, and the renal miR-196a1 miR-21 of DN mice was compared with that of NC mice. The expression of miR-200b was significantly increased, and the difference was statistically significant (P 0.05). The expression level of miR-200b miR-21 and blood glucose, triglyceride were significantly higher than those in control group. There was a positive correlation between urinary protein excretion rate of 24 h and total cholesterol excretion rate (P0.05A). The target gene of miR-196a was ANX1, HOXB7, which was predicted by miRNAs database. Compared with NC group, the expression level of m RNA of ANX1 / FOXO1 in DN group was lower than that in NC group. The difference was statistically significant (P 0.05) and ANX1. There was a positive correlation between FOXO1 and 24 h urinary protein excretion rate (P 0.05). MiR-196a may regulate ANX1. The expression of FOXO1 is involved in the development of diabetic nephropathy.
【作者單位】: 新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(81460162) 高等學(xué)?蒲杏媱濏椖(XJEDU2014I021)
【分類號】:R587.2;R692.9
【正文快照】: 糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一種以高血糖為特征的慢性代謝性疾病。糖尿病腎病(diabetic nephropathy,DN)是糖尿病患者常見的微血管并發(fā)癥之一,也是引起終末期腎臟功能衰竭(end-stage renal disease,ESRD)的重要誘因[1-3]。DN的發(fā)病與遺傳、代謝、腎臟血流動力學(xué)、高血壓
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