本文關(guān)鍵詞：嗜熱木聚糖酶基因在畢赤酵母中的表達及其酶學(xué)性質(zhì)　出處：《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2016年11期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 木聚糖酶 低聚木糖 畢赤酵母 酶學(xué)性質(zhì)

【摘要】：木聚糖酶Umxyn10A,屬于GH10家族,包含一段跨膜區(qū)和GH10家族催化功能域,將跨膜區(qū)去掉后,剩余部分重命名為Umxyn10AQ。按畢赤酵母密碼子偏好性將Umxyn10AQ序列進行密碼子優(yōu)化,與畢赤酵母表達載體p PIC9K相連。重組質(zhì)粒p PIC9K-Umxyn10AQ經(jīng)SalⅠ單酶切線性化后轉(zhuǎn)至畢赤酵母(Pichia pastoris)GS115。經(jīng)G418篩選得到重組畢赤酵母菌株GS115/Umxyn10AQ,每12 h添加1%甲醇誘導(dǎo)劑。DNS法測定重組木聚糖酶re Umxyn10AQ酶活,最高酶活達到15 U/m L,SDS-PAGE分析表明,re Umxyn10AQ相對分子質(zhì)量為45.0 k D。重組木聚糖酶re Umxyn10AQ的最適p H為8.0,最適反應(yīng)溫度85℃,Co2+對該酶活有顯著促進作用,提高了近20%,水解產(chǎn)物為木糖(14%)、木二糖(86%)。結(jié)果表明,木聚糖酶Umxyn10AQ在畢赤酵母中成功表達并且分泌到胞外,相較于大腸桿菌表達產(chǎn)物Umxyn10A,最適p H提高了1.5個單位、最適溫度提高了10個單位,p H耐受性和溫度耐受性都有所改善,并且主要水解產(chǎn)物仍為木二糖。
[Abstract]:Xylanase Umxyn10A, belonging to the GH10 family, contains a transmembrane region and a catalytic domain of the GH10 family. The rest was renamed Umxyn10AQ.The Umxyn10AQ sequence was optimized according to the codon preference of Pichia pastoris. The recombinant plasmid p PIC9K-Umxyn10AQ was linearized by Sal 鈪，

本文編號：1433755