本文關鍵詞：甘蔗細胞色素P450還原酶基因的RT-PCR擴增與表達分析　出處：《應用與環(huán)境生物學報》2016年02期 　論文類型：期刊論文

  更多相關文章： 甘蔗 ScCPR基因 亞細胞定位分析 基因表達模式分析 脅迫

【摘要】：細胞色素P450基因在電子傳遞鏈、次生代謝物質合成和對外源化學藥物毒性降解中發(fā)揮著重要作用,為了深入了解該基因在甘蔗中的功能,通過RT-PCR擴增獲得甘蔗細胞色素P450還原酶基因的cDNA全長序列,命名為ScCPR450(Gen Bank Accession Number:KR864841).該基因全長999 bp,含有744 bp的完整開放閱讀框,編碼247個氨基酸.亞細胞定位結果顯示,ScCPR450蛋白分布于細胞質中,與生物信息學預測結果相符.q RT-PCR表達分析表明,該基因在甘蔗中組成型表達,但有組織特異性,芽中表達量最高,其次是葉,而皮中表達量最低.在脫落酸(ABA)、水楊酸(SA)、茉莉酸甲酯(Me JA)、聚乙二醇(PEG)和氯化銅(CuCl_2)脅迫誘導過程中,該基因的表達量呈現(xiàn)不同變化模式,其中SA脅迫6 h下,ScCPR450基因的表達量最高,約為對照的12.21倍;在PEG脅迫下,ScCPR450基因的表達量上調且表達量穩(wěn)定,推測ScCPR450基因在甘蔗響應生物和非生物脅迫中發(fā)揮一定的作用.本研究可為該基因家族其它成員的克隆以及深入解析該基因的功能特性奠定基礎,進而為基于基因工程技術對甘蔗品種進行定向改良提供基因資源.
[Abstract]:Cytochrome P450 gene plays an important role in electron transfer chain secondary metabolite synthesis and toxic degradation of exogenous chemical drugs. In order to understand the function of cytochrome P450 gene in sugarcane. The full-length cDNA sequence of cytochrome P450 reductase gene from sugarcane was obtained by RT-PCR amplification. The gene was named ScCPR450(Gen Bank Accession Number1: KR864841. The gene was 999bp in length. A complete open reading frame containing 744 BP encoding 247 amino acids was obtained. The subcellular localization results showed that the scCPR450 protein was distributed in the cytoplasm. According to the bioinformatics prediction results, the expression of. Q RT-PCR showed that the gene was expressed constitutively in sugarcane, but it was tissue specific, and the highest expression was in bud, followed by leaf. However, the lowest expression was found in the skin, during the stress induction of abscisic acid (Aba), salicylic acid (SAA), methyl jasmonate (me JAG), polyethylene glycol (PEG) and copper chloride (CuCl2). The expression of scCPR450 was the highest at 6 h of SA stress, which was about 12.21 times of that of the control. The expression of scCPR450 gene was up-regulated and stable under PEG stress. It is speculated that ScCPR450 gene plays a certain role in sugarcane response to abiotic and biological stress. This study may lay a foundation for cloning of other members of the gene family and further analysis of the functional characteristics of the gene. Therefore, genetic resources can be provided for directional improvement of sugarcane varieties based on genetic engineering technology.
【作者單位】： 福建農林大學農業(yè)部福建甘蔗生物學與遺傳育種重點實驗室/國家甘蔗產業(yè)技術研發(fā)中心;
【基金】：國家自然科學基金項目(31101196) 福建省杰出青年基金項目(2015J06006) 福建省高等學校新世紀優(yōu)秀人才支持計劃(JA14095) 現(xiàn)代農業(yè)產業(yè)技術體系建設專項資金項目(CARS-20)資助~~
【分類號】：S566.1
【正文快照】： CLC S566.103.4:Q78細胞色素P450(Cytochrome P450,CPR)是一個超基因家族,它在真菌、細菌及動植物中均存在,是目前學術研究的焦點之一[1].其中,細胞色素P450還原酶在整個細胞色素P450酶系中起到重要功能作用.迄今,已從包括綠豆(Vigna radiate)[2]、棉花(Gossypiumhirsutum)[3]

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