疏綿狀嗜熱絲孢菌外切β-葡聚糖酶的基因克隆與酶學(xué)特征
本文關(guān)鍵詞:疏綿狀嗜熱絲孢菌外切β-葡聚糖酶的基因克隆與酶學(xué)特征 出處:《微生物學(xué)通報(bào)》2016年02期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:【目的】疏綿狀嗜熱絲孢菌是一種嗜熱絲狀真菌,具有合成與分泌多種耐熱酶的能力,從中找尋酶活高、耐熱性能優(yōu)良的β-葡聚糖酶!痉椒ā繉(duì)疏綿狀嗜熱絲孢菌其中一個(gè)外切β-葡聚糖酶的編碼基因gln B進(jìn)行克隆,并在畢赤酵母GS115中表達(dá)!窘Y(jié)果】在搖瓶水平上重組菌的產(chǎn)酶活為11.5 U/m L,重組酶在SDS-PAGE中的大小約為48 k D。重組Gln B最適作用溫度為65°C,最適作用p H為5.0;在低于50°C或p H 3.0-10.0之間具有良好穩(wěn)定性。重組酶水解海帶三糖,首先生成單糖和二糖,延長(zhǎng)酶作用時(shí)間,可以進(jìn)一步將其中的二糖部分水解為單糖!窘Y(jié)論】疏綿狀嗜熱絲孢菌來(lái)源的重組酶Gln B為外切β-葡聚糖酶,具有較好的耐熱性能和p H穩(wěn)定性。
[Abstract]:[objective] Trichoderma thermophilus is a thermophilic filamentous fungus, which has the ability to synthesize and secrete a variety of heat-resistant enzymes. [methods] one of the encoding genes of 尾 -glucanase gln B was cloned. And expressed in Pichia pastoris GS115. [results] the enzyme production activity of the recombinant strain was 11.5 UmL at shaking flask level. The size of recombinant enzyme in SDS-PAGE was about 48 KD, the optimum temperature and pH of recombinant Gln B were 65 擄C and 5.0, respectively. It has good stability between 50 擄C or pH 3.0-10.0.Recombinant enzyme hydrolyzed kelp trisaccharide, first of all, monosaccharide and disaccharide were formed, and the reaction time of enzyme was prolonged. [conclusion] the recombinant enzyme Gln B, from which the disaccharide was partially hydrolyzed to monosaccharide, was a 尾 -glucanase with good heat resistance and pH stability.
【作者單位】: 天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院;Department
【基金】:國(guó)家自然基金國(guó)際(地區(qū))合作與交流項(xiàng)目(No.31461143026) 天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃(青年)項(xiàng)目(No.14JCQNJC09200)~~
【分類號(hào)】:Q936;Q78
【正文快照】: (2.Department of BiotechnologyFood Technology,Faculty of Applied Sciences,Durban University of Technology,P.O.Box 1334,Durban,4001,South Africa)(3.福州大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院福建福州350116)β-葡聚糖以右旋葡萄糖為基本單位,通過(guò)β-1,3-(1,4)-糖苷鍵聚合而成,
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