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轉(zhuǎn)雙價(jià)抗蟲基因大白菜新種質(zhì)的獲得及其抗蟲性分析

發(fā)布時(shí)間:2018-01-07 00:18

  本文關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)雙價(jià)抗蟲基因大白菜新種質(zhì)的獲得及其抗蟲性分析 出處:《西北植物學(xué)報(bào)》2016年01期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:采用超聲波輔助花粉介導(dǎo)方法,將雙價(jià)抗蟲基因BmkIT-Chitinase導(dǎo)入早熟型大白菜自交系20-19-3,最終獲得了5個(gè)轉(zhuǎn)基因大白菜優(yōu)良自交系純合株系Z1-5、Z2-7、Z9-6、Z11-6和Z20-13;以轉(zhuǎn)基因大白菜株系和非轉(zhuǎn)基因?qū)φ罩仓隇椴牧?對(duì)BmkIT-Chitinase基因在大白菜中的遺傳規(guī)律、基因表達(dá)及抗蟲性進(jìn)行進(jìn)一步分析。結(jié)果顯示:(1)轉(zhuǎn)化株后代多代(T_1~T_4)PCR、Southern blotting等分子跟蹤檢測(cè)表明,目的基因已成功導(dǎo)入受體植株,且能夠穩(wěn)定遺傳;用該轉(zhuǎn)基因方法對(duì)大白菜進(jìn)行基因轉(zhuǎn)化所獲得的轉(zhuǎn)基因植株分析顯示,外源基因多數(shù)以多拷貝形式整合于核基因組,少部分外源基因以單拷貝形式整合。(2)Elisa分析結(jié)果證明,所導(dǎo)入的外源基因可高效表達(dá),T4代株系新鮮葉片中表達(dá)產(chǎn)物量最高達(dá)到0.069μg·g~(-1)左右。(3)轉(zhuǎn)基因株系田間抗蟲性統(tǒng)計(jì)分析表明,轉(zhuǎn)化株系與對(duì)照在抗蟲性方面有顯著差異,其對(duì)小菜蛾及菜青蟲抗性普遍提高2~3級(jí)。研究認(rèn)為,轉(zhuǎn)BmkIT-Chitinase基因大白菜中BmkIT-Chitinase基因的表達(dá)可有效提高大白菜的抗蟲性。
[Abstract]:The bivalent insect-resistant gene BmkIT-Chitinase was introduced into early maturing Chinese cabbage inbred line 20-19-3 by ultrasonic assisted pollen mediated method. Finally, five excellent inbred lines of transgenic Chinese cabbage Z1-5Z2-7Z9-6Z11-6 and Z20-13were obtained. The inheritance of BmkIT-Chitinase gene in Chinese cabbage was studied by using transgenic Chinese cabbage lines and non-transgenic control plants as materials. Gene expression and insecticidal resistance were further analyzed. Southern blotting and other molecular tracking tests showed that the target gene had been successfully introduced into the recipient plants and could be inherited stably. The analysis of transgenic plants obtained from transgenic Chinese cabbage showed that most of the foreign genes were integrated into the nuclear genome in the form of multiple copies. A small number of foreign genes were integrated by single copy. The results of Elisa analysis showed that the imported foreign genes could be expressed efficiently. The highest amount of expression products in fresh leaves of T4 generation was about 0.069 渭 g 路g ~ (-1) ~ (-1). The statistical analysis of insecticidal resistance of transgenic lines in the field showed that the transgenic lines were resistant to insect pests in the field. The resistance of transformed lines to Plutella xylostella and cauliflower caterpillar increased by 2 ~ 3. The results showed that the resistance of transformed lines to diamondback moth and cabbage caterpillar was significantly higher than that of control strain. The expression of BmkIT-Chitinase gene in transgenic Chinese cabbage with BmkIT-Chitinase gene can effectively improve the insecticidal resistance of Chinese cabbage.
【作者單位】: 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所;新疆建設(shè)兵團(tuán)第六師農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所;
【基金】:科技援疆項(xiàng)目(2014072008)
【分類號(hào)】:S436.341
【正文快照】: 大白菜(Brassica campestris L.ssp.pekinen-sis)起源于中國(guó),又稱結(jié)球白菜、白菜等,是中國(guó)乃至亞洲重要的栽培食用蔬菜之一。由于其富含維生素、糖、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)成分,深受廣大消費(fèi)者喜食。但在大白菜的栽培過(guò)程中,蟲害一直是影響其高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)及品質(zhì)的重要制約因素,其中,菜青

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本文編號(hào):1390157

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