本文關(guān)鍵詞：水稻基因啟動(dòng)子Ospz4的克隆與表達(dá)分析

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【摘要】：利用Affymetrix水稻表達(dá)芯片分析了超級(jí)稻兩優(yōu)培九母本培矮64S(Oryza sativa L.)在經(jīng)過低溫、干旱、高溫等逆境條件脅迫處理后,不同組織器官在不同的生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期全基因組的表達(dá)差異。篩選到一個(gè)在正常條件和逆境條件下均有較高表達(dá)水平的基因Os SG4(Gen Bank登錄號(hào):AK068991.1),從水稻日本晴基因組中克隆得到其上游啟動(dòng)子區(qū)域Ospz4(1 625 bp),將其與GUS報(bào)告基因融合構(gòu)建植物表達(dá)載體p CAMBIA1301P4,并用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化臺(tái)北309獲得轉(zhuǎn)基因植株。組織化學(xué)染色結(jié)果表明,Ospz4啟動(dòng)子可驅(qū)動(dòng)GUS報(bào)告基因在轉(zhuǎn)基因水稻植株的葉片,根、莖、穎花、胚乳及胚芽鞘中均有表達(dá)。在該啟動(dòng)子的基礎(chǔ)上,構(gòu)建了4個(gè)不同長(zhǎng)度的5'端缺失片段啟動(dòng)子與GUS報(bào)告基因融合的植物表達(dá)載體,通過注射煙草(Nicotiana benthamiana)進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)分析,結(jié)果表明,4個(gè)片段均可驅(qū)動(dòng)GUS基因的表達(dá),其中最短片段(492 bp)的表達(dá)活性最強(qiáng)。本研究表明Ospz4啟動(dòng)子可用于研究與遺傳改良生產(chǎn),具有重要的理論與實(shí)踐價(jià)值,并有助于該啟動(dòng)子的改造。
【作者單位】： 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)過程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然基金(31501393) 湖南省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(14JJ3146)共同資助
【分類號(hào)】：S511
【正文快照】： *同等貢獻(xiàn)作者Cloning and Expression Analysis of Rice Gene Promoter Ospz4Yang Liying1,2*Wang Manling2*Zhao Yang2He Lixiong1**Xia Xinjie2**1 College of Bioscience and Biotechnology,Hunan Agricultural University,Changsha,410128;2 Key Laboratory of Agro-ecol

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