本文關鍵詞：新Cry1B蛋白基因的篩選與鑒定

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【摘要】：[目的]Cry1B類殺蟲蛋白對鱗翅目和鞘翅目昆蟲具有較好的殺蟲活性,具有廣闊的應用前景。為進一步挖掘并研究Cry1B類蛋白。[方法]本文使用一對引物對24個Bt菌株進行定性PCR反應,嘗試篩選新的cry1B基因。該引物能夠擴增包括Cry1B蛋白N-端3個結構域在內(nèi)的718個氨基酸編碼序列。[結果]共有8個菌株包含cry1B基因,約占篩選菌株的33.3%。序列分析發(fā)現(xiàn),獲得8個基因中有6個為新基因,其中6-1和15-1基因編碼氨基酸序列與Cry1Bd1完全相同;9-1、10-1、18-1、20-1和21-1對應氨基酸序列與Cry1Bd1的一致性≥98.5%;而4-1基因編碼的氨基酸序列與Cry1Bb1和Cry1Bc1蛋白N-端僅差1個氨基酸,需要進一步鑒定C-端長尾的編碼序列以判斷其所屬亞類。[結論]本研究獲得6種新型Cry1B蛋白基因,為進一步解析這類蛋白的殺蟲活性和機理提供了豐富的材料。
【作者單位】： 山西農(nóng)業(yè)大學生命科學學院;山西農(nóng)業(yè)大學農(nóng)業(yè)生物工程研究所;
【基金】：國家自然科學基金項目(31601690) 山西省基礎研究項目自然科學基金面上項目(2015011080) 山西農(nóng)業(yè)大學科技創(chuàng)新基金(2014015)
【分類號】：S476
【正文快照】： 目前,蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringien-sis,Bt)表達的晶體殺蟲蛋白依然是轉基因抗蟲作物的主要功能蛋白。其中,Cry1B類對鱗翅目的歐洲玉米螟(Ostrinia nubilalis)、亞洲玉米螟(Os-trinia furnacalis)、小菜蛾(Plutella xylostella)、馬鈴薯塊莖蛾(Phthorimaea operculella

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本文編號：1289116