利用體外合成mRNA方法研究Betatrophin對(duì)糖代謝關(guān)鍵基因表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:利用體外合成mRNA的方法研究新基因Betatrophin在HepG2細(xì)胞中對(duì)糖代謝關(guān)鍵基因表達(dá)的影響。方法:以合成Betatrophin mRNA的質(zhì)粒為模板,體外合成Betatrophin mRNA轉(zhuǎn)染入HepG2細(xì)胞,利用免疫熒光和Western blot檢測(cè)Betatrophin mRNA在細(xì)胞內(nèi)Betatrophin蛋白過(guò)表達(dá)情況,再利用qPCR和Western blot檢測(cè)Betatrophin過(guò)表達(dá)對(duì)糖代謝關(guān)鍵基因表達(dá)影響。結(jié)果:成功構(gòu)建Betatrophin mRNA合成載體,體外合成的Betatrophin mRNA可高效轉(zhuǎn)染到HepG2細(xì)胞株中并正確表達(dá)Betatrophin蛋白,高表達(dá)的Betatrophin可上調(diào)糖代謝關(guān)鍵基因Glut2表達(dá)。結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)初步證實(shí)Betatrophin可能是通過(guò)調(diào)控Glut2表達(dá)來(lái)影響糖代謝,為進(jìn)一步研究Betatrophin對(duì)調(diào)控糖代謝的分子作用機(jī)制打下基礎(chǔ)。
【作者單位】: 十堰市太和醫(yī)院·湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院胚胎干細(xì)胞湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;湖北醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院;
【基金】:2016年湖北省自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(2016CFB408) 國(guó)家自然科學(xué)基金應(yīng)急管理項(xiàng)目(81641028) 湖北省衛(wèi)生計(jì)生委一般項(xiàng)目(WJ2015MB223) 2015年湖北醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院本科生科研訓(xùn)練計(jì)劃(SRTP)項(xiàng)目
【分類(lèi)號(hào)】:R587.1
【正文快照】: 糖尿病已成為21世紀(jì)人們廣泛關(guān)注的慢性代謝性疾病之一[1],其是一種由于機(jī)體內(nèi)分泌胰島素的相對(duì)或絕對(duì)不足引起的以血糖升高為主的代謝性疾病,其中2型糖尿病在臨床上所占比例高達(dá)95%以上[2]。2型糖尿病是由于各種不良誘因使機(jī)體出現(xiàn)胰島素敏感性降低,從而進(jìn)一步形成胰島素抵抗
【相似文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1268121
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