發(fā)布時(shí)間：2017-12-03 06:19

  本文關(guān)鍵詞：滲透壓調(diào)控啟動子表達(dá)木糖醇脫氫酶基因XYL2對重組釀酒酵母木糖代謝的影響

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【摘要】：滲透壓調(diào)控啟動子在高底物濃度或鹽類物質(zhì)誘導(dǎo)下可實(shí)現(xiàn)目標(biāo)基因的高表達(dá)和可控表達(dá),因此可用于構(gòu)建新的代謝工程菌株.利用來源于可耐高滲的產(chǎn)甘油假絲酵母(Candida glycerinogenes)的滲透壓調(diào)控啟動子PCgSTL3、PCgZWF和PCgGPD,在釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中控制木糖醇脫氫酶基因XYL2的表達(dá)水平,并研究其在NaCl誘導(dǎo)下對木糖醇脫氫酶活性及重組釀酒酵母木糖代謝流的影響.結(jié)果顯示,以組成型強(qiáng)啟動子PTPI為對照,添加0.4 mol/L NaCl作為滲透壓誘導(dǎo)劑后,滲透壓調(diào)控啟動子控制下的木糖醇脫氫酶活性均得到增強(qiáng),其中在PCgGPD控制下其活性變化最為明顯,酶活提高了2.8倍.同時(shí),以PCgGPD控制XYL2基因表達(dá)的重組菌木糖消耗量、乙醇產(chǎn)量和產(chǎn)率均為最高,與無誘導(dǎo)劑相比分別提高了62.3%、30.7%和9.7%,副產(chǎn)物木糖醇產(chǎn)率最低,下降了53.3%.本研究表明,滲透壓調(diào)控啟動子PCgGPD可顯著提高木糖醇脫氫酶活性,通過添加NaCl作為滲透壓誘導(dǎo)劑可實(shí)現(xiàn)對XYL2基因的可控表達(dá),顯著降低木糖醇積累,提高乙醇產(chǎn)率.
【作者單位】： 江南大學(xué)糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室生物工程學(xué)院工業(yè)微生物研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31270080,31570052) 江蘇省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(BK20140138,BK20140134)資助~~
【分類號】：Q78
【正文快照】： CLC Q939.97木質(zhì)纖維素類物質(zhì)作為一種含量豐富的可再生資源,其利用受到廣泛關(guān)注.利用木質(zhì)纖維素發(fā)酵生產(chǎn)乙醇,能夠有效緩解石油能源枯竭的壓力.在木質(zhì)纖維素的水解產(chǎn)物中除葡萄糖外,最重要的可利用資源是D-木糖[1],但是傳統(tǒng)的釀酒酵母無法直接利用木糖,僅能利用其異構(gòu)物木酮

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 林燕清;謝志鵬;張建國;鮑文娜;潘海峰;李博義;;葡萄糖酸氧化桿菌木糖醇脫氫酶基因的克隆與表達(dá)(英文)[J];微生物學(xué)報(bào);2012年06期

2 沈曉波;齊向輝;朱宏陽;徐虹;;Gluconobacter oxydans木糖醇脫氫酶基因的克隆表達(dá)及木糖醇的轉(zhuǎn)化分析[J];中國生物工程雜志;2009年12期

3 陳宏文;茍?jiān)?張卡;方柏山;;米曲霉木糖醇脫氫酶的分子模建與對接[J];微生物學(xué)報(bào);2011年07期

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6 汪天虹,MerjaPentil　,李波;帶有木糖還原酶基因和木糖醇脫氫酶基因的重組釀酒酵母的構(gòu)建[J];菌物系統(tǒng);1999年03期

7 楊_，

本文編號：1247731